| 查看: 998 | 回复: 4 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
snmrna铁杆木虫 (著名写手)
|
[求助]
请教下筛选程序问题（HPLC）
|
||
|
我有很多菌（主要是放线菌）的发酵液（>1000），需要用HPLC来分析哪些产大环内酯类物质（阳性率在10%以下）。目前了解到可以通过混合十个样品的发酵液来检测，阴性则检测完毕，阳性则选五个来混合继续测定，如此筛选下去。。。 我算得的一个样筛选次数期望在0.335-0.37，我想肯定有最好的方案，请各位前辈指教下！感激不尽 |
回复此楼» 猜你喜欢
梦想
已经有3人回复
-
面上合作单位盖章
已经有3人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有17人回复
-
看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉……
已经有5人回复
-
导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！
已经有4人回复
-
基金不中，共勉
已经有7人回复
-
为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？
已经有11人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有17人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有8人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 编译vasp主程序时，makefile中的链接库选择问题
已经有15人回复
- 请教一下大家，关于孔径分布的评价标准选取问题
已经有9人回复
- 始终使用选择的程序打开这种文件 的问题
已经有8人回复
- 蓝白斑筛选问题
已经有6人回复
- 用于筛选微生物的土壤样品采样、保存问题
已经有10人回复
- 【讨论】真诚请教推荐人选择问题
已经有20人回复
- 【求助】aspen流程图中选择单元操作的一个小问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】抗微管药物的体外筛选问题
已经有13人回复
- 【求助】请教色谱柱选择的问题
已经有17人回复
- zeocin筛选稳定细胞系问题
已经有3人回复
【答案】应助回帖
snmrna(金币+5): 2011-09-18 17:30:34
snmrna(金币+15): 2011-09-22 17:54:11
snmrna(金币+15): 2011-09-22 17:54:11
|
有时候你的菌产大环内脂类抗生素，但是单位很低，这在没有进行发酵优化的情况下是很常见的，直接混合进样有可能会造成漏检。 我给你的意见是用固相萃取技术，最好用C18或者聚苯乙烯树脂的SPE柱对发酵液进行浓缩处理，因为大环内酯类抗生素都有一定的亲脂性，在这类SPE柱上能够很好的吸附。发酵液上SPE柱之后水洗，然后用甲醇或乙醇洗脱下来。在上HPLC之前我还建议你用生物活性法测定下。把洗脱液点在纸片上，挥发掉溶剂之后贴在枯草芽孢杆菌的琼脂板上，因为大环内酯类抗生素对革兰氏阳性菌有抑制性。琼脂板37度培养12小时后如果有抑菌圈，证明其可能有产物，如果没有抑菌圈，其有产物的可能性基本没有。然后将有活性的洗脱液做HPLC，经过浓缩HPLC上的峰应该能很清楚的看出来，如果你们又DAD检测器什么的应该能很好的进行确定了。 |
5楼2011-09-18 15:31:53
snmrna
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 11949.2
- 散金: 68
- 红花: 8
- 沙发: 1
- 帖子: 1081
- 在线: 443.4小时
- 虫号: 1112353
- 注册: 2010-10-01
- 专业: 环境微生物学
2楼2011-08-03 16:06:27
lzxfil
木虫 (著名写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2048.5
- 红花: 5
- 沙发: 1
- 帖子: 2002
- 在线: 616小时
- 虫号: 146507
- 注册: 2005-12-26
- 性别: GG
- 专业: 微生物药物
3楼2011-08-04 10:09:25
snmrna
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 11949.2
- 散金: 68
- 红花: 8
- 沙发: 1
- 帖子: 1081
- 在线: 443.4小时
- 虫号: 1112353
- 注册: 2010-10-01
- 专业: 环境微生物学
4楼2011-08-04 11:51:13
投票:
