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btx362237729

金虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE水封压线不平!

做了SDS-PAGE胶几次了,老是水封的时候分离胶压得不平整,坑坑洼洼的。。。加水的时候从左上角加得很慢很轻的,不知道为什么会这样

再问个问题,水和分离胶应该会互溶的吧。。。。用水封不就把最上面的分离胶稀释了吗?????

[ Last edited by btx362237729 on 2011-8-2 at 12:23 ]
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人生最黑暗的时光终于过去了
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金虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by liukgg at 2011-08-02 14:17:07:
不平的原因可能是TEMED加的太多,还没有压好胶就凝了,建议少加点TEMED,操作尽量迅速。水对分离胶影响不大,直接加上就行,只要没有气泡就好

10%的胶加4ul TMED不多吧。。。。。。但我就是不平啊。。。。。。
人生最黑暗的时光终于过去了
3楼2011-08-02 14:39:05
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btx362237729

金虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by 看不懂牛津 at 2011-08-02 18:15:05:
我们实验室10%的胶,15ml体系加10ulTEMED,我还没出现过水封不平的情况~

很牛啊 从来没出现过。。。
人生最黑暗的时光终于过去了
7楼2011-08-02 18:56:54
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btx362237729

金虫 (正式写手)

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8楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-08-02 19:22:51:
你的玻璃板洗干净了吗?要洗到蒸馏水落在上面即不聚成水滴,也不成股留下,应该成水膜。你用的什么仪器,那里的玻璃板。你配置的试剂是用的ddH2O吗?还有你可以尝试一下把所有试剂除了TEMED过膜,这样会好很多。

肯定是ddH2O的。。。。。估计是玻璃的问题
人生最黑暗的时光终于过去了
9楼2011-08-02 19:46:26
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金虫 (正式写手)

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10楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-08-02 19:48:53:
你的仪器是哪个公司的?你用什么东西洗得,还有,你洗完用蒸馏水和双蒸水冲吗?



带着手套我先用自来水冲,用洗洁精洗。。。但是始终感觉玻璃上有油一样,水附上面洗不掉。。。。。然后用蒸馏水冲洗  然后用ddH2O洗,,,但是始终有油一样


郁闷
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11楼2011-08-02 19:56:00
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btx362237729

金虫 (正式写手)

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12楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-08-02 20:00:19:
试试用洗衣服洗,还有你用的洗洁精是不是不好啊。我一般使用洗衣服洗。你用的这套仪器我没用。我用过伯乐的和北京百晶的,都不错。

那我去试试洗衣粉
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13楼2011-08-02 20:31:50
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金虫 (正式写手)

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12楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-08-02 20:00:19:
试试用洗衣服洗,还有你用的洗洁精是不是不好啊。我一般使用洗衣服洗。你用的这套仪器我没用。我用过伯乐的和北京百晶的,都不错。

洗衣粉没效果。。。。。。还是一层水 还有五颜六色的油光一样的东西
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14楼2011-08-02 20:41:30
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btx362237729

金虫 (正式写手)

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15楼: Originally posted by gwbk at 2011-08-02 20:41:56:
天气热,胶凝的快,配胶的时候把烧杯放到冰盒里面,灌好胶再用预冻的dd水压平,在桌子上蹲几下,然后放置待凝~哈哈。

实验室空调开着 应该不是温度的问题哦。。。。。。
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16楼2011-08-02 20:43:58
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金虫 (正式写手)

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18楼: Originally posted by gwbk at 2011-08-02 22:57:21:
是的,我们实验室也有空调,对空调这么有信心?夏天,吹空调屋里的温度也会是四季中最高的。。。
我做实验的时候,如果不放在冰盒里,虽然有空调,做胶也会像你说的那样~~~
可以试一下,嘿嘿

应该不会是凝得太快吧。。。下次我加只2ul TMED试试
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19楼2011-08-03 10:23:22
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btx362237729

金虫 (正式写手)

感谢大家的回答,今天用洗衣粉 洗洁精+乙醇擦了玻璃板。。。。。。然后再制胶终于水封压平了。。。非常平的一直线实验果然还是要多练啊
人生最黑暗的时光终于过去了
22楼2011-08-03 14:32:23
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