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bflower

银虫 (初入文坛)

[求助] 酶活与酶蛋白含量关系

请问非纯酶的液态体系(含有两种酶A、B以及别的杂质)中,测定的A、B酶活与测定的总酶蛋白含量是否存在相关性?
酶活单位定义与酶活单位浓度定义之间可以换算吗,换言之1U/L是不是意味着1L的该液态中含有1U的酶?
急用!!万分感谢!!
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家在石家庄

新虫 (小有名气)

引用回帖:
748507楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-27 09:50:34
非纯酶的液体中,某种酶的活力测定可能与总蛋白质有相关性,但这个相关性也不是绝对的。在纯酶中由于蛋白质较少,蛋白质容易钝化,这时候加一点BSA就能稳定酶的结构,使得酶的活力能较强较持久。但是在蛋白质较多的 ...

你好,我要测定肝组织SOD和CAT酶活性,看有的文献单位用U/ml,有的用U/mgprot,不测蛋白浓度,直接用U/ml可以吗?这个有没有标准的规定呢?
6楼2012-09-16 11:14:20
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+5, BioEPI+1): 2011-07-27 10:54:43
bflower(金币+5): 2011-08-29 19:59:40
非纯酶的液体中,某种酶的活力测定可能与总蛋白质有相关性,但这个相关性也不是绝对的。在纯酶中由于蛋白质较少,蛋白质容易钝化,这时候加一点BSA就能稳定酶的结构,使得酶的活力能较强较持久。但是在蛋白质较多的时候再增加其它蛋白质含量就影响不大了,但也说不定还有某些蛋白质能协同你的酶作用。

酶活单位定义的国际标准是:一分钟转化1微摩尔底物或产生1微摩尔产物所需的酶量。1U/L意味着1L的该液态中含有1U的酶。酶活力还有另一种,是相对于纯酶的,此时所有的蛋白质都是这种酶,测定活力后可以使用U/mg,就是每mg酶的蛋白质有多少活力。“酶活单位浓度定义”我不知道你说的是什么意思。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-07-27 09:50:34
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bflower

银虫 (初入文坛)

谢谢楼上二位!!
4楼2011-07-31 10:57:28
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cexoihtydx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢参与,祝顺利! 2011-08-28 18:01:09
个人考虑:
不管是纯酶与否,都用PH值适宜的缓冲液溶解,都需要离心去除沉淀,因沉淀中含有杂质和没有活力的蛋白,即死蛋白,取上清进行下一步的操作或用于测量蛋白浓度,可能会更好点。
有时酶的表达量很高,测得的蛋白浓度也较大,但操作中常因变性等原因,形成死蛋白,这对后面酶活力的测定计算还是有影响的。
不放弃,日子总有阳光,追求总有希望!
5楼2011-08-28 16:23:35
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