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wensdo

金虫 (小有名气)

[求助] 色谱柱与流动相问题

各位老师,我测样品用的流动相是甲醇-乙酸铵,梯度洗脱,C18柱 ,但很短时间,在40min左右就鼓出一个包,不规则的,请教各位,有没碰到类似情况,该如何保护色谱柱,使柱子寿命更长?
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石呓

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


novus(金币+1): 谢谢交流,欢迎常来药学版! 2011-07-25 22:53:59
wensdo(金币+10): 2011-10-25 10:09:37
你说40min出了一个包,具体什么情况说得不是很清楚,有可能是样品残留,或者其他什么情况,不见得是柱子柱效不好嘛~
关于柱子保护的问题,我个人觉得就是善待柱子。
比如你做样前用甲醇水溶液梯度调整比例,从高浓度慢慢降低浓度,直到你所用流动相所适应的甲醇浓度
又如做样完了,用不含盐的等浓度甲醇水溶液冲洗柱子,除去柱子中的盐,然后慢慢升高甲醇浓度,直到保存溶剂所要求的条件。
甚至,在你调流速时,不要马上从0升到到1.0,而是以0.2的流速慢慢升高,让柱子有个适应的过程,都是对柱子有保护作用的。
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索。
3楼2011-07-25 21:01:54
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中药2000

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

该如何保护色谱柱,使柱子寿命更长?
每次做完实验彻底冲柱子。
2楼2011-07-25 20:26:18
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wensdo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 石呓 at 2011-07-25 21:01:54:
你说40min出了一个包,具体什么情况说得不是很清楚,有可能是样品残留,或者其他什么情况,不见得是柱子柱效不好嘛~
关于柱子保护的问题,我个人觉得就是善待柱子。
比如你做样前用甲醇水溶液梯度调整比例,从高 ...

我们一直就是这么做的,而且也换用了好几根柱子,都存在着问题,怀疑是不是流动相的问题,有没可能流动相把检测池给污染了?要是这样的话,该如何处理?
4楼2011-07-26 07:36:21
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liu_wei

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


qinhy(金币+1): 多谢应助~~ 2011-08-01 18:30:22
建议加入的乙酸铵要为色谱级的,要是没有色谱级的使用分析级的一定要过滤后使用。流动相中加入盐本来就很难平衡,建议盐的浓度不要超过10mM.检测器没有那么容易污染,要是真污染了就只能用异丙醇冲冲了。你可以检查一下看看溶剂瓶中的滤头是不是受到污染,基线出现问题大多都是水相有问题。
5楼2011-07-26 10:05:12
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