应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 动物细胞蛋白提取含量低
51/1返回列表
查看: 1955  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Illfxy

铜虫 (小有名气)

[求助] 动物细胞蛋白提取含量低

这两天提了两次蛋白但是含量都很低， 师兄过年那段时间提的有最高的有80ug/ml，可是这两天我用了同样的药品和方法 提出来只有20多，细胞密度挺高的不知为何。会不会与离心温度有关 ，我们实验室用冷冻离心机的人少，那台机子长期没人修，我也是才去，没办法就用了常温 。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
探索人类未来的其中一人
1楼 2011-07-24 19:56:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by Illfxy at 2011-07-26 10:29:04:
恩，我会问问师兄的。蛋白离心我用的12000 10min这个影响应该不大吧

尽量够20分钟吧!
赞一下 回复此楼
8楼2011-07-26 11:48:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Illfxy(金币+2): 谢谢回复，你这一说，我觉得裂解液应该重新配一次来试试，还有那个离心温度会不会有很大影响 2011-07-25 11:51:49
你的裂解液中加了蛋白酶抑制剂了不？是不是浓度不够啊。还有提蛋白跟温度有很大关系，尽量在冰上操作，可以最大限度保证蛋白不被降解
赞一下 回复此楼
2楼2011-07-25 09:31:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Illfxy

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-07-25 09:31:54:
你的裂解液中加了蛋白酶抑制剂了不？是不是浓度不够啊。还有提蛋白跟温度有很大关系，尽量在冰上操作，可以最大限度保证蛋白不被降解

裂解液是师兄之前4月配的，我也不清楚里面加了蛋白酶抑制剂了没，他说效果还好，就留着用了。我整个过程都尽量在冰上操作的，没有冷冻离心机，最后一步我用的是常温离心10min。室温很高开空调吹了两个小时还有27度，会不会是离心温度太高了？
赞一下 回复此楼
探索人类未来的其中一人
3楼2011-07-25 11:45:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-07-26 10:34:09
你最好确定一下是否加了蛋白酶抑制剂。如果没加，那蛋白浓度肯定高不了；如果加了，是什么时候加的，蛋白酶抑制剂最好是现用现加，而且他的有效时间一般在1-2个小时左右。最后一步室温离心问题不大。蛋白不是14000，20min吗？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-07-26 07:09:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭