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z45858502

铜虫 (初入文坛)

[求助] 辣椒的内参基因

谁知道辣椒的内参基因,用于荧光定量PCR用的。mrna序列或者引物序列啊
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吃苦耐劳,阳光自信
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押沙龙1989

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by z45858502 at 2011-08-06 08:09:52
已经找到内参了。谢谢大家

你好,我最近要做辣椒的半定量,请问你使用的内参基因是怎样的?很希望能和你交流一下!
牵牛花呀,一朵深渊色。
6楼2014-11-13 14:22:20
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barrey

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
adslye(金币+3): 不错是这理~鼓励交流~祝顺利! 2011-08-04 08:51:24
silicare(BioEPI+1): 2011-08-04 11:57:01
z45858502(金币+1): 谢谢了 2011-08-06 08:07:02
这个,现在内参基因标准不一,植物中普遍应用的内参基因主要有Actin、Ubiqutin、EF1a等,至于序列嘛,应该很多参考文献都有列出的,上述提到的内参基因也不是绝对,最近几年在好几个物种中就有报道,这些基因在不同的生物和非生物胁迫条件表达水平完全趋于不变,需要具体情况具体分析。
2楼2011-08-03 17:52:07
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adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3, BioEPI+1): 2011-08-04 11:56:50
z45858502(金币+1): 谢谢。不过这些方法我都知道 2011-08-06 08:06:49
z45858502(金币+1): 回答太笼统了 2011-08-10 13:30:56
z45858502(金币+2): 2011-08-12 08:33:04
1.你可以去genbank搜:18S,28S,40S,Elongation factor,Eukaryotic initiation factor,ACTIN,Beta-tubulin,  Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,  Cyclophilin,Polyubiquitin等以上关键词。(以上关键词来自于这些文章BMC Plant Biol ,Jana Jarošová,2010 。Mallona et al. BMC Plant Biology 2010, 10:4 。BMC Plant Biology 2009, 9:84 。Érica Duarte Silveira 1 Huis et al. BMC Plant Biology 2010, 10:71)
2.推荐你去BMC PLANT,和BMC Molecular Biology这个杂志找找,登了很多物种内参选择的文章。看有没有你的物种你条件下的内参。
你如果时间充裕的话,建议自己筛内参(当然在没有内参稳定性研究报道的前提下)。毕竟每种诱导条件下,或者生长条件下,内参是否稳定是不确定的。
vandesompele, J. (2002). "Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes." Genome Biology (上面那个结论就是这篇文章的研究,被引用了3000多次)
3楼2011-08-04 09:03:32
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z45858502

铜虫 (初入文坛)

已经找到内参了。谢谢大家
吃苦耐劳,阳光自信
4楼2011-08-06 08:09:52
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