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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 问个qPCR的小问题
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

[求助] 问个qPCR的小问题

被同事问到一个问题，发现答不上来...这个~~只好求助大家了。
如下图所示，两个样品，一个ct小，但平台期指数低，一个ct大，但平台期指数高。熔解曲线很漂亮，说明无非特异性扩增。按照一般理解，扩增曲线的纵坐标与产物浓度应该是正相关的，那为什么ct小（即模板量高）的样品最后的产物浓度反而更低呢？
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1楼 2011-07-23 09:19:15
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refreshing11

新虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by holyala at 2011-07-23 09:22:10
啊啊啊...追加问题
再如下图，ct值相同，平台期值不同又是神马原因？？

快一年没来了，还在这个领域吗，希望能多见到一些你的关于转录组的内容，
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5楼2015-02-04 15:17:32
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
啊啊啊...追加问题
再如下图，ct值相同，平台期值不同又是神马原因？？
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refreshing11
2楼2011-07-23 09:22:10
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love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

holyala(金币+2): 嗯嗯...有道理~~谢谢！ 2011-07-23 21:23:39
荧光PCR又不是终点定量，平台比较低说明模板浓度过高，已经过早达到饱和状态
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3楼2011-07-23 11:40:51
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
holyala(金币+2): 谢谢！受教了~ 2011-07-25 09:58:16
dhd997(金币+3, MolEPI+1): 很热心，专业 2011-07-25 10:03:13
holyala(金币+1): 好久没来，再加一分！ 2011-09-20 18:13:57
你的Q-PCR仪貌似应该是ABI的7300或者是7500，很熟悉的界面啊。正像3楼所说的，Q-PCR不是做终点定量，因此你无法通过终点的值来确定产物的浓度。还有你跑完反应后要先通过机器的先对Ct值进行校正后才能拿来分析，原始结果你是没法分析的。
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-07-24 11:08:46
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