应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Ex taq酶的保真性？？
51/1返回列表
查看: 3315  |  回复: 4
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

匿名

用户注销 (小有名气)
本帖仅楼主可见

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2011-07-20 21:08:06
已阅   同方向广播   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wickhamhan(金币+3): 恩 十分感谢！~ 2011-07-20 21:37:44
西瓜(金币+3): 鼓励 2011-07-21 11:52:16
引用回帖:
Originally posted by wickhamhan at 2011-07-20 21:29:01:
我的模板是高GC的~还是准备换酶试试呢

解决方法：
（1）先换高保真酶重新扩增片段
（2）如果突变位点离的很近的话可以同时设计引物对发生突变的位置进行修复
（3）如果条件允许多转几种感受态细胞，比如DH5a、Stable2或3、SURE
赞一下(1人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-07-20 21:34:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wickhamhan(金币+3): 2011-07-20 21:28:20
西瓜(金币+5, EPI+1): Good！ 2011-07-21 11:52:00
这个未必完全是酶的原因，你要看突变位点在什么地方：
（1）如果在引物内的某一位点发生突变则基本上是又有引物本身的问题，尤其是引物的最后一个碱基是A的时候，他之后的一个碱基发生突变的几率较其他3中碱基要大的多
（2）片段序列中含特殊序列：高GC或连续的多个串联重复序列在PCR扩增片段时以及连到载体并在受体菌内扩增时容易发生突变
（3）酶的保真性，不过你的片段只有600多，现在常用的普通Taq酶扩增一般的片段不会出现那么多突变，所以主要由前两个因素引起
赞一下(1人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2011-07-20 21:22:38
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)
本帖仅楼主可见
赞一下
3楼2011-07-20 21:29:01
 已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

豆豆鱼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 同意啊！ 2011-07-21 11:52:28
wickhamhan(金币+1): 2011-12-11 00:13:07
产物长度不是很长，应该与酶的关系不大，一般的酶扩增1000多的都不会有太大问题，只是测序后有点突变，因素很多，要看突变位置了，静等高手赐教！
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-07-20 21:53:50
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭