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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助！农杆菌侵染霉菌孢子的问题。谢谢大家啦
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raulzxcv

木虫 (小有名气)

[求助] 求助！农杆菌侵染霉菌孢子的问题。谢谢大家啦

各位大侠，小妹实验上遇到了困难，请大家帮帮忙呵呵。我最近的实验是农杆菌侵染霉菌孢子，就是农杆菌中的Ti质粒使霉菌基因突变，这是植物病理学上常用的一种方法，我的问题是当农杆菌和霉菌孢子共培养三天后有单克隆长出，然后倒入含有抗生素的霉菌培养基，按理说应该5-6天才会看到霉菌，可是第二天就有菌落出现，而且不是霉菌，第三天的时候满版都长满了黄色的，干燥的东西，也不知道是不是菌，如果是的话，是什么菌？请做过类似实验的虫虫指导一下吧，谢谢啦
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1楼 2011-07-20 20:04:31
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jxcydm

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by anlewo7777 at 2011-07-20 22:18:55:
应该是染菌了，你注意一下操作吧，好像含抗生素培养基应该在早些倒进去吧，覆盖就行了。应该是在预计你的孢子已经萌发的时间倒进去。然后看能穿过抗性培养基层的认为是转化子，拿去验证

但好像覆盖很容易长出来啊，野生型的也一样，是不是要提高一下筛选浓度啊？
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3楼2011-07-21 20:31:26
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anlewo7777

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

raulzxcv(金币+2): 谢谢啦 2011-07-21 22:13:34
应该是染菌了，你注意一下操作吧，好像含抗生素培养基应该在早些倒进去吧，覆盖就行了。应该是在预计你的孢子已经萌发的时间倒进去。然后看能穿过抗性培养基层的认为是转化子，拿去验证
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2楼2011-07-20 22:18:55
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anlewo7777

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

raulzxcv(金币+2): 谢谢啦 2011-07-21 22:25:29
如果你的抗生素平板的抑制效果有限的话，你害怕覆盖会稀释抗生素浓度，你可以将共培养的孢子涂在膜上，共共培养时间时间过了之后，将膜揭下来，转到抗性板上；如果你的抗性板连野生型的也抑制不住，你有必要提高浓度。
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4楼2011-07-21 21:58:40
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raulzxcv

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by anlewo7777 at 2011-07-20 22:18:55:
应该是染菌了，你注意一下操作吧，好像含抗生素培养基应该在早些倒进去吧，覆盖就行了。应该是在预计你的孢子已经萌发的时间倒进去。然后看能穿过抗性培养基层的认为是转化子，拿去验证

先是共培养，共培养的培养基应该是不加抗生素的吧
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5楼2011-07-21 22:16:08
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