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maomao809920

金虫 (小有名气)

[求助] RCR自己怎么都做不出来,但是同样条件下师哥帮着做了,却出来了,求助原因

最近在做PCR,新手一枚,跨专业到生物化学专业。。
师哥指导下做了PCR,之后跑了电泳,但是什么都没有。
然后师哥自己做了一遍(同样的药品、仪器、体系),电泳后就有条带了。。
之后自己又做了一遍,依旧没有,很桑心。想知道为什么。。

分析了一下,觉得应该是自己使用移液枪加样的不规范导致的,在加样的时候应该注意什么,是不是每次加样的时候,枪头都要深入至小离心管管底?

求各位大侠指导了,是不是我操作有问题。。

先谢谢了!
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
dhd997(金币+2): 谢谢交流 2011-07-18 12:46:23
应该说PCR是最简单的操作了,应该说这个的确有不稳定性因素和运气在里面,但是我觉得主要还是熟能生巧,现在我们都用PCR Mixture 更加简单了,希望你能找点相关试剂盒 PCR mixture 相信能给你带来不少的方便
将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
6楼2011-07-18 00:36:48
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green1223

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

maomao809920(金币+2): 谢谢~ 2011-07-17 21:51:31
加DNA模板时,把枪头深入底部 吸打几次再加入就没问题了
2楼2011-07-17 19:00:41
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

【答案】应助回帖

量少,不会没加进去吧
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
3楼2011-07-17 20:06:51
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maomao809920

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-07-17 20:06:51:
量少,不会没加进去吧

我觉得也是。。但是都离心了,应该也会沉淀下去吧。。。
4楼2011-07-17 21:53:39
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