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[交流]
问一下蛋白表达中出现的问题~
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最近在做蛋白表达跑电泳的时候总在目的条带附近出现一条比较拖尾的条带，其他区域条带都很正常，因为带his标签，所以WB砸了一下，发现诱导前、诱导后全菌、诱导后上清、沉淀均砸出条带，诱导前可能是表达泄露了，因为上清中太少，过了下柱子基本没东西，所以只能洗包涵体，现在想问下各位大牛箭头所指那条有点拖尾的条带是怎么回事，载体是pRSET-A，应该就是我的目的蛋白，因为换别的载体表达也在目的大小出现这样的拖尾条带，请问这影响我纯化吗，打抗体用？ 图中从第二张图从左到右到第一张图为诱导前全菌、诱导4h全菌、上清、沉淀，一共挑了7个单克隆。 谢谢各位啦~~ [ Last edited by snowice on 2011-7-18 at 00:40 ] |
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