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raulzxcv

木虫 (小有名气)

[求助] 急求,真菌孢子计数!多谢各位啦

各位虫虫,我最近在做孢子计数,首先要先洗下孢子,再用血球计数板计数,请问做过此试验的同学们能告诉我具体的做法吗(只是洗孢子部分,包括准备的实验用具),最好详细一点哈,十分感谢啦
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+6, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-17 19:11:30
raulzxcv(金币+3): 太感谢了,学习了 2011-07-18 20:13:16
要是不经常数,那就不用买专门计数的仪器了,浪费钱。

数孢子数是很快的,而且在菌不老的时候收集的孢子活力足够,数出来的数量跟平板计数法差不多的,平板计数法还要等3天才能数菌落,时间都耽误过去了。

很多曲霉的孢子都很多,在很多种培养基上都能发育出丰富的孢子。当菌落产生孢子的3天之后孢子一般就成熟而不老,数量多,是制取孢子悬浮液的最好时机。这时候孢子与孢子梗不容易脱落,用溶液很难冲洗得出,我会把溶液加到平板上,用牙签刮,连同菌丝一起刮下去。刮到瓶子或15毫升小试管里剧烈震荡使孢子脱落,均匀,摇床是不靠谱的,涡旋混合器可以。由于孢子量比菌丝多得多,对我的实验没有什么影响。所以我不用过滤了,如果你想过滤,就用八层纱布。

数孢子的时候别用薄的盖玻片,要用配套的厚的,因为薄的会被溶液稍微托起来使得格子可以容纳多一点孢子液,使得结果偏大。加孢子液的时候要先放好盖玻片,孢子液从盖玻片与计数板接触处加,会立即渗透满整个计数格。

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10楼2011-07-17 18:40:41
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854930330

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我想知道,制成的孢子悬浮液我是用来做植物侵染的,那如果不用的话应该怎么保存呢?对孢子的数量或者质量有没有影响啊,谢谢
13楼2012-02-20 16:12:57
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普通回帖

gwbk

木虫 (正式写手)

我都是稀释涂平板,数菌落个数,准确无误。
老板有钱的话,买个这个吧。
http://www.ebiotrade.com/custom/BIO-RAD/100730/

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2楼2011-07-13 22:13:39
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yguang

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 2011-07-14 12:50:43
raulzxcv(金币+2): 多谢 2011-07-14 20:36:44
精确称取培养物适量(1g左右)倒入盛有玻璃珠的三角瓶内,加入95%酒精5ml、无菌水20ml、稀硫酸(1:10)10ml,在旋涡均匀器上充分振摇,使孢子分散,然后用三层纱布过滤,用无菌水反复冲洗,务使滤渣不含孢子,最后稀释定容至500ml。
3楼2011-07-14 00:18:14
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raulzxcv

木虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by gwbk at 2011-07-13 22:13:39:
我都是稀释涂平板,数菌落个数,准确无误。
老板有钱的话,买个这个吧。
http://www.ebiotrade.com/custom/BIO-RAD/100730/

多谢啦
4楼2011-07-14 20:34:14
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xumingbest

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 感谢参与,欢迎常来 2011-07-14 23:46:07
raulzxcv(金币+2): 多谢了 2011-07-15 22:09:55
先取100微升灭菌水冲洗孢子,然后用枪吸出孢子菌悬液至于EP中,取1微升滴于载玻片上,轻轻盖上盖玻片,不要有气泡,然后再血球计数办上查孢子就可以了。
5楼2011-07-14 21:39:58
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

什么微生物的孢子,是不是真菌,如果是,是什么真菌,要数多少个,经常数吗,实验室里有什么计数用的仪器,光学显微镜和血球计数板有吗?

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6楼2011-07-15 06:44:46
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raulzxcv

木虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-15 06:44:46:
什么微生物的孢子,是不是真菌,如果是,是什么真菌,要数多少个,经常数吗,实验室里有什么计数用的仪器,光学显微镜和血球计数板有吗?

恩,有的啊,我用血球计数板
7楼2011-07-15 22:10:29
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-15 06:44:46:
什么微生物的孢子,是不是真菌,如果是,是什么真菌,要数多少个,经常数吗,实验室里有什么计数用的仪器,光学显微镜和血球计数板有吗?

什么微生物的孢子,是不是真菌,如果是,是什么真菌,要数多少个,经常数吗?
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8楼2011-07-16 01:11:27
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raulzxcv

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-16 01:11:27:
什么微生物的孢子,是不是真菌,如果是,是什么真菌,要数多少个,经常数吗?

是曲霉的孢子,也不是经常数
9楼2011-07-16 16:14:26
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