应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DGGE胶回收问题
51/1返回列表
查看: 2004  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

[求助] DGGE胶回收问题

DGGE胶怎样回收？跑一次DGGE，回收胶PCR后可以测序吗？一般用常规测序还是克隆测序？还有我用的是巢式PCR，测序时的引物该用目的片段的引物吗？还是两对引物都要？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-07-12 12:47:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by piaoyuaaa at 2011-07-15 09:07:52:
你们都是自己做的克隆吗？没做过克隆，感觉挺难的，实验室条件也不成熟，要是让公司去克隆测序，一个反应两百多，好贵

是啊。自己做克隆麻烦，省钱。公司给做肯定得200多啊，人力成本高啊。
赞一下 回复此楼
6楼2011-07-15 09:56:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-12 21:00:23
piaoyuaaa(金币+2): 2011-07-13 15:09:29
回收后需要采用没有GC夹子的引物进行PCR扩增，产物克隆后测序。
克隆后采用载体引物测序就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-07-12 13:38:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyuaaa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xiadongliang at 2011-07-12 13:38:32:
回收后需要采用没有GC夹子的引物进行PCR扩增，产物克隆后测序。
克隆后采用载体引物测序就可以了

我回收了一次DGGE胶，然后用没有带夹子的引物做PCR,扩出来的目的条带很亮，但紧挨着目的条带上方有不很亮的条带，若不仔细看就是和目的片段连到一起了，不知道什么原因
http://good.gd/1394954.htm
赞一下 回复此楼
3楼2011-07-13 15:09:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)
你的是什么样本啊？不会是植物的吧？
不用管上面这个带，直接克隆后去阳性克隆就可以了。两个片段离得很远，筛选阳性克隆时能够区分开。
赞一下 回复此楼
4楼2011-07-14 08:38:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭