| 查看: 3932 | 回复: 13 | ||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
yanjun3830木虫 (正式写手)
|
[求助]
请教一下构建、表达方面的问题
|
|
| 为什么我构建的菌种只表达标签GST而不表达目的蛋白，想请教一下高手出现这种情况的原因会是什么呢？会不会是没连上，但是酶切鉴定还是好的啊！望这方面的高手给予指教，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有282人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
yanjun3830
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2208.6
- 散金: 78
- 红花: 2
- 帖子: 306
- 在线: 91.2小时
- 虫号: 1051135
- 注册: 2010-07-02
- 性别: GG
- 专业: 生物无机化学
送鲜花一朵 
14楼2011-07-15 14:51:39
足下客
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 10
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 1858.8
- 散金: 211
- 红花: 12
- 帖子: 888
- 在线: 110.4小时
- 虫号: 426612
- 注册: 2007-07-28
- 性别: MM
- 专业: 临床分子生物学检验
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): 很专业了 2011-07-12 19:30:20
yanjun3830(金币+10): 谢谢，很不错的解答！ 2011-07-13 08:58:43
dhd997(金币+5, EPI+1): 很专业了 2011-07-12 19:30:20
yanjun3830(金币+10): 谢谢，很不错的解答！ 2011-07-13 08:58:43
|
1、你是否确定你构建的载体是完全正确地，只靠酶切验证时不够的，做PCR验证，再测序。 2、你连接上的这个基因片段用表达载体上的启动子可以启动表达吗？如果不可以，要克隆出这个基因自身的启动子，构建到表达载体上。 3、有些蛋白的表达可能需要很多因素，例如是否要加诱导剂、是否要低温表达等。 由于我只是以前看同学做过蛋白表达，这些原因也是同学碰到过的，所以只能给你提供这些建议了，仅供参考。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
2楼2011-07-12 12:44:53
【答案】应助回帖
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-07-12 19:30:49
yanjun3830(金币+5): 谢谢！ 2011-07-13 09:00:56
dhd997(金币+3): good 2011-07-12 19:30:49
yanjun3830(金币+5): 谢谢！ 2011-07-13 09:00:56
|
1.宿主菌合适吗？会不会，把你的外源基因表达产物降解，或者有抑制其表达的因素。 2。考虑下目的基因的表达量，检测方法的准确及精确性。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
3楼2011-07-12 12:57:47
yanjun3830
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2208.6
- 散金: 78
- 红花: 2
- 帖子: 306
- 在线: 91.2小时
- 虫号: 1051135
- 注册: 2010-07-02
- 性别: GG
- 专业: 生物无机化学
4楼2011-07-13 08:56:40