有人提取过PET-28a的质粒吗？ - 分子生物 - 综合其他 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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yang0071

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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-12 19:28:31

引用回帖:

Originally posted by chunmeiyang at 2011-07-09 09:35:09:
我们用的TIANGEN的试剂盒，你们用过吗？不知道这个跟试剂盒有没有关系

pET28质粒拷贝数是比较低，但是适当提高一下菌量，用一般的试剂盒都没问题。。

tiangen的试剂盒还可以的，有钱的话或者比较重要质粒考虑QIAGEN的

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11楼2011-07-09 09:55:35

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txy8469393

木虫 (小有名气)

拿着扫把的研究僧

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★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-12 19:28:42

直接用碱法提提就是了，省钱又简单，俺们实验室从来不用试剂盒提质粒。

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找我请打110,你别看我拿着扫把,其实我是弹吉他的!

12楼2011-07-10 08:27:33

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475502411

铜虫 (著名写手)

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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-12 19:28:54

跟试剂盒没多大关系，想好好看看说明书，是不是有低级错误出现，预冷，裂解时间，体制伦理要动作轻柔，不会提不到的，除非你的菌没有改质粒

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可以朝九晚五，也能浪迹天涯

13楼2011-07-10 09:05:06

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cxcx1013

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

Originally posted by chunmeiyang at 2011-07-08 22:28:52:
你一般用几ml 菌液提的啊

我一般提pET28的用3ml菌液。

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14楼2011-07-12 12:35:41

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cascc

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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-12 19:29:07

就是拷贝数比较低，所以感觉有点难提取，事实上还是可以提出来的，只是别其它克隆载体质粒要量少一些，碱裂解法适当增加菌液的量。还可以用试剂盒。

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15楼2011-07-12 14:07:36

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zhcosa

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经常提的，碱法和tiangen的试剂盒都用过，没遇到过问题。
楼主注意一下抗性和浓度就可以了。祝你好运！

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16楼2011-07-13 10:41:10

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自然_法则

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我最近刚提了的，效果很好啊，我们用的是Omega公司的质粒提取试剂，不要一个小时就提出来了，而且效果还不错

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每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论

17楼2013-04-07 21:23:24

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胡故城

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10楼: Originally posted by chunmeiyang at 2011-07-09 09:35:09
我们用的TIANGEN的试剂盒，你们用过吗？不知道这个跟试剂盒有没有关系...

TIANGEN的试剂盒比起Omega质粒提取试剂盒应该提取效果较差，肯定的是和试剂盒无关。

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18楼2014-01-06 19:21:00

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方天翼614

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8楼的战友说的挺好我补充下:需要添加5ul卡娜工作液

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19楼2017-06-15 11:07:54

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