| 查看: 2574 | 回复: 8 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
happywoheni铁虫 (小有名气)
|
[求助]
【求助】基因克隆T载体酶切问题等
|
||
|
求助啊，本人纯属菜鸟，问题较多，请大家帮帮忙！ 1：引物中添加的限制性酶切位点是选择T载体上有的还是没有的？完全不懂！ 2：我做基因克隆，用的上游引物5‘加了BamH1酶切位点，下游引物5’加了EcoR1酶切位点,可以用宝生物的pmD-19 T载体吗？ 3：我现在做pcr产物的纯化，想问一下，下一步T载体和pcr产物都要经过双酶切之后，再连接吗？还是T载体可以不用双酶切，只是pcr产物双酶切？还是其他？ 4：pcr产物可以直接双酶切吗，酶切缓冲液用哪一种，温度一个是30度一个是37度。 5：如果T载体不用酶切，直接连，酶切鉴定作用是什么？怎么做？用这两种限制性内切酶切吗？切完之后是不是有很多段？ 5：蓝白斑筛选操作步骤 在线等，急…… |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有228人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因克隆中酶切连接问题
已经有13人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 做一个克隆所需的最短时间？比比谁更高效快速！
已经有39人回复
- pGEM-T Easy载体的相关问题-讨论
已经有7人回复
- 【求助/交流】【求助】细菌未知功能基因的克隆方法
已经有14人回复
- 【求助/交流】基因克隆时，酶切有结果，PCR却P不出来
已经有11人回复
- 请教：基因克隆 酶切
已经有2人回复
- 克隆基因全长引物设计问题
已经有32人回复
happywoheni
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 144.8
- 红花: 1
- 帖子: 54
- 在线: 24.5小时
- 虫号: 1012188
- 注册: 2010-05-05
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2011-07-06 22:42:45
happywoheni
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 144.8
- 红花: 1
- 帖子: 54
- 在线: 24.5小时
- 虫号: 1012188
- 注册: 2010-05-05
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2011-07-07 07:23:24
happywoheni
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 144.8
- 红花: 1
- 帖子: 54
- 在线: 24.5小时
- 虫号: 1012188
- 注册: 2010-05-05
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2011-07-07 07:25:00
happywoheni
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 144.8
- 红花: 1
- 帖子: 54
- 在线: 24.5小时
- 虫号: 1012188
- 注册: 2010-05-05
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2011-07-09 19:24:06