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zhougama

禁虫 (正式写手)

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sweetcrystal

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by zhougama at 2011-07-06 17:33:22:
dNTP的浓度没有问题吧,我买的试剂都是100mM的浓度。一般是要求终浓度为200uM,但是因为不可能去那么去取0.1ul或者是更少,所以选择去1ul,这个应该不会影响很大吧。

不是我说你,100mM的不会稀释到10mM的啊,0.1到1是十倍的差距,一般普通PCR的dNTPs浓度0.3mM就足够了,你这体系里都5mM的了,你说有问题不
11楼2011-07-06 21:45:40
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zhougama

禁虫 (正式写手)

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2楼2011-07-06 15:39:50
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qhuzhl

金虫 (小有名气)

你可以根据你的离子浓度等情况用软件算下退火温度,做个梯度.
3楼2011-07-06 15:40:52
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love_st

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

zhougama(金币+5): 2011-07-07 09:01:23
zhougama(金币+1): 2011-07-07 12:40:35
zhougama(金币+10): 非常感谢你,果然是dNTPs的浓度问题,今天稀释之后进行了PCR,结果P出条带了。 2011-07-07 19:41:28
你这dNTPs的浓度不对吧
4楼2011-07-06 16:23:02
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