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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 急！急！求助！请大家帮我分析下为什么仅仅进样体积不一样，峰形就变了呢？！
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by 真爱至上青青 at 2011-06-23 21:08:38:
如题，先上两张图，大家看下，
先是2uL,后是10uL，液相条件是一样的，柱子也是有一样的，可是怎么就不一样了呢？请大家帮帮我吧！谢谢啦！


[eimg]67/c6/918948_1 ...

色谱柱过载了，一根色谱柱的容量有限的
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gwmgyp
11楼2011-06-28 17:06:56
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真爱至上青青

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 朝阳小狐狸 at 2011-06-28 11:36:52:
从峰高响应来看，个人认为这个量没有过载。感觉你的流动相应该是调酸的，峰型不好的原因个人认为：2微升的时候，在这个位置出峰，流动相里的酸能够满足将你的样品充分质子化，因而峰型较好；当进样量变成了10微升 ...

您的解答很详细，万分感谢！
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12楼2011-06-29 19:13:01
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真爱至上青青

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gwmgyp at 2011-06-28 17:06:56:
色谱柱过载了，一根色谱柱的容量有限的

谢谢你的回复
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13楼2011-06-29 19:13:35
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真爱至上青青

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sundh at 2011-06-28 17:01:32:
我同意9层的说法，如果过载峰顶不应该是尖的。

谢谢你的回复
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14楼2011-06-29 19:19:26
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真爱至上青青

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yukepotato at 2011-06-27 22:34:06:
怎么不附个2ul的图啊？对比下看看好下结论！

有2uL和10uL的，在一楼
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15楼2011-06-29 19:20:18
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真爱至上青青

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 朝阳小狐狸 at 2011-06-28 11:36:52:
从峰高响应来看，个人认为这个量没有过载。感觉你的流动相应该是调酸的，峰型不好的原因个人认为：2微升的时候，在这个位置出峰，流动相里的酸能够满足将你的样品充分质子化，因而峰型较好；当进样量变成了10微升 ...

我也认为没有过载，这两张图都是对照品的谱图，而我前面也进过一针10微升的待测样品，峰型是正常的，峰面积也和10微升的对照品的峰面积接近。关于调节酸度，我现在用的流动相是甲醇：1%醋酸水溶液，如果想调大酸度，那我可不可以用2%的醋酸水呢？还有因为是做标准曲线，就不好用流动相来溶解对照品吧？
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16楼2011-06-29 19:27:38
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yilimomo

新虫 (小有名气)
除柱子外，进样以及柱子到检测器都可能导致峰形变差
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风风雨雨混实验室的日子，都是为了文章~~
17楼2011-06-29 20:02:44
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朝阳小狐狸

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 真爱至上青青 at 2011-06-29 19:27:38:
我也认为没有过载，这两张图都是对照品的谱图，而我前面也进过一针10微升的待测样品，峰型是正常的，峰面积也和10微升的对照品的峰面积接近。关于调节酸度，我现在用的流动相是甲醇：1%醋酸水溶液，如果想调大 ...

我们这边经常用0.5%的醋酸水溶液，我测过PH约等于3,你是不是写错了？1%？0.5%貌似是上限呀。要么你加点缓冲盐试试，这样可以多加许多酸进去
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18楼2011-07-04 10:02:14
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真爱至上青青

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 朝阳小狐狸 at 2011-07-04 10:02:14:
我们这边经常用0.5%的醋酸水溶液，我测过PH约等于3,你是不是写错了？1%？0.5%貌似是上限呀。要么你加点缓冲盐试试，这样可以多加许多酸进去

计算的话，1%醋酸水的PH是2.75，我的柱子PH范围是1.5~10，这应该没有问题吧？
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19楼2011-07-05 16:05:57
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朝阳小狐狸

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 真爱至上青青 at 2011-07-05 16:05:57:
计算的话，1%醋酸水的PH是2.75，我的柱子PH范围是1.5~10，这应该没有问题吧？

应该没问题，只是做完了以后注意用高比例的水相过度一下，把酸替换掉，再用乙腈冲冲就好。
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20楼2011-07-06 10:24:45
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