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曲散人别

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助mtt高手有关DMSO浓度影响的问题

各位大虾,小生正在做mtt肿瘤活性测试,用的是实验室自制的化学合成产物,使用的是DMSO作为药物溶剂的。刚看文献发现DMSO对于肿瘤细胞是有诱导凋亡作用的。想请问各位一般应把DMSO控制在多少浓度以内,另外实验过程中是不是应该设一个DMSO的浓度对照作为阴性对照?这个对照的DMSO浓度应该设为多少?
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wyj

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-07-19 00:21:26
据文献报道,DMSO在细胞中的终体积分数为0.1%时即有细胞毒作用,一般实验时在90ul细胞悬注中加溶媒或药物10 ul,据此推算,所配的药物中含DMSO的浓度不能超过1%。
不管所加DMSO有无细胞毒作用,如果药物用DMSO溶解,阴性对照均应加相同浓度的DMSO对照,这是药效学实验设计的基本原则。
附参考文献4篇,相信对有类似问题者均有帮助。
6楼2011-07-18 21:46:51
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jessica-wang

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


westzilch(金币+1): 谢谢交流! 2011-06-23 10:19:13
曲散人别(金币+20): 谢谢 2011-06-23 14:50:50
是检测药物对肿瘤细胞增殖抑制率的实验。
一般要求,在工作浓度下,DMSO的浓度要小于0.2%(为体积比,也有书上说0.5%)。在这个浓度下,认为对细胞不会产生毒性。
另外,在DMSO的浓度小于0.2%的情况下,我们一般不做溶媒对照组。
2楼2011-06-22 22:25:39
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westzilch

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

曲散人别(金币+10): 谢谢 2011-06-23 14:51:06
同意楼上的观点,我们一般做都保持在0.1%以下,没有问题,也不用对照
3楼2011-06-23 10:19:50
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xiaoniu_e

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢回帖! 2011-07-19 00:21:01
我们做,是把每个浓度都做了个溶剂的隐性对照的。也不算太麻烦。
主要是我们的DMSO浓度要大一些,没办法,太低了东西要析出来。
4楼2011-06-26 21:17:24
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