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cxbmh

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3, EPI+1): 感谢交流 2011-07-17 20:18:42
zyx335588(金币+5): 谢谢 2011-07-31 00:43:08
引用回帖:
Originally posted by zyx335588 at 2011-06-21 15:37:17:
最近我用质粒转化表达菌株BL21(DE3)和Rosetta(DE3),长出的单菌落摇16个小时左右,取200微升接到3mL LB培养基中摇四五个小时后看不出有变化,请问各位高人,这是为什么啊。按说200微升菌体量已经很大了,而且 ...

首先要做的时:
1、枪头、菌管高温湿法灭菌(保证洁净度)
2、操作的时候,严格按无菌操作流程做(杜绝外来污染源)
3、可是尝试增大到6-7ml;同时培养时间适当延长,如过夜等
4、检测培养的条件:温度、转速
5、结果如果还是如上的话可能原因:
     a、你的菌株本来就是假阳性,
     b、扩繁菌株系老化,更换菌株
     c、如果不是菌株的问题,重新电击或热击。
6楼2011-07-16 21:53:13
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