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lwd19831217

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

paulajjh(金币+2): 很详细,谢谢交流,前几天自己做了一下,脱盐效果还是有的,但上样量太少了 2011-06-20 22:48:12
G25粉末应该先要溶胀的,先用沸水煮一下或者直接放去离子水里面2-3d,然后装柱时主要要倒掉漂浮的小颗粒,如果是国产的一般柱子的话,胶的表面最好上个滤纸片,以保证胶面的平整。
脱盐柱和分子筛不一定要一样,胖点就可以了,高度和直径的比例尽量超过2以上。
我们现在用的GE的小预装柱直径大约1.6cm高约3cm,每次上样大约0.5-1mL的样子。
我以前自己装的柱子约是5cm(d)X20cm(h)的,大约能上30mL样品,
过的时候同时监测UV和电导,普通缓冲液电导一般不到十吧,你脱盐柱分离后应该在UV出完后再出电导的峰。出电导我一般到5左右的就不收了。
经常在实验中遇到UV能出好几个峰(主要是硫酸铵沉淀脱盐中遇到的),前面先出一个,后面在盐离子峰时UV也有,曾经尝试收集过,发现至少不是蛋白。
11楼2011-06-20 21:25:57
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