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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 除盐柱如何用？G25
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lwd19831217

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

paulajjh(金币+2): 很详细，谢谢交流，前几天自己做了一下，脱盐效果还是有的，但上样量太少了 2011-06-20 22:48:12
G25粉末应该先要溶胀的，先用沸水煮一下或者直接放去离子水里面2-3d，然后装柱时主要要倒掉漂浮的小颗粒，如果是国产的一般柱子的话，胶的表面最好上个滤纸片，以保证胶面的平整。
脱盐柱和分子筛不一定要一样，胖点就可以了，高度和直径的比例尽量超过2以上。
我们现在用的GE的小预装柱直径大约1.6cm高约3cm，每次上样大约0.5-1mL的样子。
我以前自己装的柱子约是5cm(d)X20cm(h)的，大约能上30mL样品，
过的时候同时监测UV和电导，普通缓冲液电导一般不到十吧，你脱盐柱分离后应该在UV出完后再出电导的峰。出电导我一般到5左右的就不收了。
经常在实验中遇到UV能出好几个峰（主要是硫酸铵沉淀脱盐中遇到的），前面先出一个，后面在盐离子峰时UV也有，曾经尝试收集过，发现至少不是蛋白。
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11楼2011-06-20 21:25:57
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