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琼脂糖凝胶电泳什么条件跑出来好看
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zyly605
银虫
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[交流]
琼脂糖凝胶电泳什么条件跑出来好看
在论文里用的电泳图,什么条件跑出来更好看?比如多大电压,琼脂糖浓度多少?EB的浓度有影响吗?之类的,谢谢
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2011-06-16 09:27:34
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天使托
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引用回帖:
Originally posted by
beautybanana
at 2011-06-16 10:15:07:
琼脂糖浓度 最佳线性DNA分辨范围(bp)
0.5% 1,000~30,000
0.7% 800~12,000
1.0% 500~10,000
1.2% 400~7,000
1.5% ...
敢问这些数据有何参考吗?
请给出参考的东西。谢谢!
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6楼
2011-06-16 12:03:08
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ty1987
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zyly605(金币
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):谢谢参与
1949stone(金币+2): 1.6 有点高啊 2011-06-16 10:56:29
胶的浓度可以提高到1.6%,电压可以开小点,慢慢跑,另外,在制胶时把胶板洗干净,跑电泳前把电泳缓冲液换新的,那样的效果会好点。
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2011-06-16 09:49:38
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beautybanana
木虫
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zyly605(金币
+1
):谢谢参与
1949stone(金币+2): 鼓励 学习 2011-06-16 10:57:03
引用回帖:
Originally posted by
zyly605
at 2011-06-16 09:27:34:
在论文里用的电泳图,什么条件跑出来更好看?比如多大电压,琼脂糖浓度多少?EB的浓度有影响吗?之类的,谢谢
琼脂糖浓度 最佳线性DNA分辨范围(bp)
0.5% 1,000~30,000
0.7% 800~12,000
1.0% 500~10,000
1.2% 400~7,000
1.5% 200~3,000
2.0% 50~2,000
电压:10V/cm
EB:1ul EB/10mL胶
具体跑的好不好看要看样品的质量如何了~ 。~
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3楼
2011-06-16 10:15:07
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lxj341401
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zyly605(金币
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1949stone(金币+2): 支持 2011-06-16 10:56:46
引用回帖:
Originally posted by
zyly605
at 2011-06-16 09:27:34:
在论文里用的电泳图,什么条件跑出来更好看?比如多大电压,琼脂糖浓度多少?EB的浓度有影响吗?之类的,谢谢
具体问题具体分析。琼脂糖浓度和要分离的DNA大小有关系的,不同浓度适合不同大小的DNA,一般规律是DNA越小所用浓度越高;电压低点更好,但要保证电泳能30-60min完成,时间太长了也不好。EB浓度影响不大,只是要电泳图的话浓度高点也无所谓,回收的话要考虑EB浓度。
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4楼
2011-06-16 10:56:00
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