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zyly605

银虫 (小有名气)


[交流] 琼脂糖凝胶电泳什么条件跑出来好看

在论文里用的电泳图,什么条件跑出来更好看?比如多大电压,琼脂糖浓度多少?EB的浓度有影响吗?之类的,谢谢
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引用回帖:
Originally posted by beautybanana at 2011-06-16 10:15:07:
琼脂糖浓度     最佳线性DNA分辨范围(bp)
0.5%              1,000~30,000
0.7%                 800~12,000
1.0%                 500~10,000
1.2%                 400~7,000
1.5%               ...

敢问这些数据有何参考吗?
请给出参考的东西。谢谢!
6楼2011-06-16 12:03:08
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ty1987

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
zyly605(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 1.6 有点高啊 2011-06-16 10:56:29
胶的浓度可以提高到1.6%,电压可以开小点,慢慢跑,另外,在制胶时把胶板洗干净,跑电泳前把电泳缓冲液换新的,那样的效果会好点。
2楼2011-06-16 09:49:38
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★ ★ ★
zyly605(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 鼓励 学习 2011-06-16 10:57:03
引用回帖:
Originally posted by zyly605 at 2011-06-16 09:27:34:
在论文里用的电泳图,什么条件跑出来更好看?比如多大电压,琼脂糖浓度多少?EB的浓度有影响吗?之类的,谢谢

琼脂糖浓度     最佳线性DNA分辨范围(bp)
0.5%              1,000~30,000
0.7%                 800~12,000
1.0%                 500~10,000
1.2%                 400~7,000
1.5%                 200~3,000
2.0%                   50~2,000
电压:10V/cm     
EB:1ul EB/10mL胶
具体跑的好不好看要看样品的质量如何了~ 。~
3楼2011-06-16 10:15:07
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★ ★ ★
zyly605(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 支持 2011-06-16 10:56:46
引用回帖:
Originally posted by zyly605 at 2011-06-16 09:27:34:
在论文里用的电泳图,什么条件跑出来更好看?比如多大电压,琼脂糖浓度多少?EB的浓度有影响吗?之类的,谢谢

具体问题具体分析。琼脂糖浓度和要分离的DNA大小有关系的,不同浓度适合不同大小的DNA,一般规律是DNA越小所用浓度越高;电压低点更好,但要保证电泳能30-60min完成,时间太长了也不好。EB浓度影响不大,只是要电泳图的话浓度高点也无所谓,回收的话要考虑EB浓度。
4楼2011-06-16 10:56:00
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