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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳什么条件跑出来好看
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zyly605

银虫 (小有名气)

[交流] 琼脂糖凝胶电泳什么条件跑出来好看

在论文里用的电泳图，什么条件跑出来更好看？比如多大电压，琼脂糖浓度多少？EB的浓度有影响吗？之类的，谢谢
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1楼 2011-06-16 09:27:34
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ty1987

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by wjt5856 at 2011-06-16 13:46:43:
现在还用EB么？不是都换新的毒性弱的染料了么

对哦，现在不都用GOLDVIEW了吗？
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10楼2011-06-16 14:02:03
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ty1987

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
zyly605(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 1.6 有点高啊 2011-06-16 10:56:29
胶的浓度可以提高到1.6%，电压可以开小点，慢慢跑，另外，在制胶时把胶板洗干净，跑电泳前把电泳缓冲液换新的，那样的效果会好点。
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2楼2011-06-16 09:49:38
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beautybanana

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
zyly605(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 鼓励 学习 2011-06-16 10:57:03
引用回帖:
Originally posted by zyly605 at 2011-06-16 09:27:34:
在论文里用的电泳图，什么条件跑出来更好看？比如多大电压，琼脂糖浓度多少？EB的浓度有影响吗？之类的，谢谢

琼脂糖浓度     最佳线性DNA分辨范围（bp)
0.5%              1,000~30,000
0.7%                 800~12,000
1.0%                 500~10,000
1.2%                 400~7,000
1.5%                 200~3，000
2.0%                   50~2,000
电压：10V/cm     
EB:1ul EB/10mL胶
具体跑的好不好看要看样品的质量如何了~ 。~
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3楼2011-06-16 10:15:07
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
zyly605(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 支持 2011-06-16 10:56:46
引用回帖:
Originally posted by zyly605 at 2011-06-16 09:27:34:
在论文里用的电泳图，什么条件跑出来更好看？比如多大电压，琼脂糖浓度多少？EB的浓度有影响吗？之类的，谢谢

具体问题具体分析。琼脂糖浓度和要分离的DNA大小有关系的，不同浓度适合不同大小的DNA，一般规律是DNA越小所用浓度越高；电压低点更好，但要保证电泳能30-60min完成，时间太长了也不好。EB浓度影响不大，只是要电泳图的话浓度高点也无所谓，回收的话要考虑EB浓度。
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4楼2011-06-16 10:56:00
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