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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 16srDNA扩增问题，急
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彼岸花开V
送鲜花一朵
11楼2011-06-14 17:04:17
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by mirror3895 at 2011-06-14 09:50:34:
拍胶不就1、2分钟的事，有就有，没有就是没有，不会要很久吧，如果是你说的情况，得紫外灯一直开着，那对仪器也不好吧。可以试试改变退火温度的吧

谢谢提醒啊~我是新手，很多不懂的
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以马内利！
12楼2011-06-14 19:22:59
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 彼岸花开V at 2011-06-14 17:04:17:

谢谢啦
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以马内利！
13楼2011-06-14 19:23:21
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by mirror3895 at 2011-06-14 09:50:34:
拍胶不就1、2分钟的事，有就有，没有就是没有，不会要很久吧，如果是你说的情况，得紫外灯一直开着，那对仪器也不好吧。可以试试改变退火温度的吧

楼主说Maker变淡嘛，那可能就是紫外开太久了

PCR产物少，程序是要优化下的，呵呵
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14楼2011-06-14 22:36:17
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xiadongliang

金虫 (正式写手)
dNTP(0.25 mM)          0.5 μl

dNTP浓度应该为2.5mM吧，然后加2 uL。
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15楼2011-06-15 09:56:40
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-06-14 22:36:17:
楼主说Maker变淡嘛，那可能就是紫外开太久了

PCR产物少，程序是要优化下的，呵呵

非常感谢啊
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以马内利！
16楼2011-06-15 10:26:29
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiadongliang at 2011-06-15 09:56:40:
dNTP(0.25 mM)          0.5 μl

dNTP浓度应该为2.5mM吧，然后加2 uL。

非常感谢啊
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以马内利！
17楼2011-06-15 10:26:47
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niyq

木虫 (小有名气)
marker都没了，可能跟点样有点关系，点样的时候DNA没有沉到点样孔的底部，造成跑胶的时候溢出，很有可能，拍照时快点；dntp的确太少了，卖的大多是2.5或10mm的啊，中浓度应在0.2-0.4um之间
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18楼2011-06-15 23:05:19
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duanhs

银虫 (小有名气)
你扩增的片段较长，可以尝试用一下HiFi Taq DNA polymerase
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19楼2011-07-07 09:22:01
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