16srDNA扩增问题，急 - 分子生物 - 综合其他 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

bear0329

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Originally posted by mirror3895 at 2011-06-14 09:50:34:
拍胶不就1、2分钟的事，有就有，没有就是没有，不会要很久吧，如果是你说的情况，得紫外灯一直开着，那对仪器也不好吧

。可以试试改变退火温度的吧

谢谢提醒啊~我是新手，很多不懂的

以马内利！

12楼2011-06-14 19:22:59

bear0329

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Originally posted by 彼岸花开V at 2011-06-14 17:04:17:

谢谢啦

以马内利！

13楼2011-06-14 19:23:21

西瓜

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引用回帖:

。可以试试改变退火温度的吧

楼主说Maker变淡嘛，那可能就是紫外开太久了

PCR产物少，程序是要优化下的，呵呵

14楼2011-06-14 22:36:17

xiadongliang

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dNTP(0.25 mM) 0.5 μl

dNTP浓度应该为2.5mM吧，然后加2 uL。

15楼2011-06-15 09:56:40

bear0329

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Originally posted by 西瓜 at 2011-06-14 22:36:17:
楼主说Maker变淡嘛，那可能就是紫外开太久了

PCR产物少，程序是要优化下的，呵呵

非常感谢啊

以马内利！

16楼2011-06-15 10:26:29

bear0329

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Originally posted by xiadongliang at 2011-06-15 09:56:40:
dNTP(0.25 mM) 0.5 μl

dNTP浓度应该为2.5mM吧，然后加2 uL。

非常感谢啊

以马内利！

17楼2011-06-15 10:26:47

niyq

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marker都没了，可能跟点样有点关系，点样的时候DNA没有沉到点样孔的底部，造成跑胶的时候溢出，很有可能，拍照时快点；dntp的确太少了，卖的大多是2.5或10mm的啊，中浓度应在0.2-0.4um之间

18楼2011-06-15 23:05:19

duanhs

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你扩增的片段较长，可以尝试用一下HiFi Taq DNA polymerase

19楼2011-07-07 09:22:01