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五木凋零

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 关于蛋白质粘稠的问题

我用硫铵沉淀得到的蛋白质样品，粘稠，且有点像果冻一样，根本没有办法做后续试验，求高人帮助
样品里面的蛋白含量并不高

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1楼2011-06-13 16:17:34

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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

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专业: 环境微生物学
管辖: 微生物

微生物在培养过程中产生多糖是很正常的，就像黄单胞菌一样，培养基里没有加多糖，但发酵出来却能用乙醇提取得到很多多糖，所以也不知道你的这个菌是不是在发酵过程中产生了多糖了。

糖蛋白是在蛋白质的氨基酸残基上连接糖分子，可以连接一个也可以连接多个，糖链可以只有一个也可以有多个连接成链条，至于你的这个蛋白质会不会形成和形成怎样的糖链就难说了，可以查一下已经发表的文章，参考一下。但是我觉得，如果只有一个蛋白质形成糖链为糖蛋白，也不可能引起那么高的粘度，因为一个蛋白质的表达量一般不会超过1%的总蛋白，除非是人为改造过的菌造成某个蛋白质表达量超高，要么就是很多蛋白质都形成糖蛋白，但更有可能的是有多糖，因为多糖的链可以是很长的。

过层析柱不一定意味着样品被稀释，过镍柱会稀释，但你的蛋白质从你的表述上来看应该是野生蛋白质，不能过镍柱。过分子筛是绝对会被稀释的，过疏水层析和离子交换说不定还能浓缩，因为我试过把300毫升酶液上到20毫升柱床体积的离子交换层析柱中，洗脱后有酶活力的收集管合并之后只有50毫升。