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shaquila

金虫 (正式写手)

[交流] 关于洋葱表皮亚细胞定位的问题~~已有7人参与

构建好了GFP fusion载体,本来是要用基因枪的,后面发现做不了
问问能不能用农杆菌介导的方法做,我自己试试一下,方法如下,但是貌似没有侵染进去,请问需要怎么改进?

2.8盘1洋葱表皮预培养
用镊子撕取洋葱里表皮 1cm2小块放在MS培养基上,28℃预培养5h。
2.83)侵染液制备
将菌液加入含抗生素的LB培养基,培养过夜,5000离心5分钟,收集菌体,LB重悬浮,分光光度计测定菌液浓度,其浓度调至OD=1左右。
2.83)浸染
将上述菌液倒入到预培养培养基中,泡 30min,期间摇动数次。倒去菌液,将洋葱表皮置于灭菌滤纸上吸干表面菌液。
接入共培养培养基(MS培养基加AS),28℃暗培养2天观察。
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wangqizhao

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
可以用原生质体的
3楼2011-06-13 23:43:59
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shaquila

金虫 (正式写手)

下周准备做,因为要买一堆药品,还没到,所以想先试试,哈
4楼2011-06-14 10:02:34
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underdog007

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
培养洋葱表皮的MS培养基什么都不加吗?
5楼2012-12-20 16:21:27
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沙漠落日

金虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-20 10:38:32
Transgenic  tobacco   plants   over  expressing  cold  regulated   protein  CbCOR15b
from  Capsella   bursa-pastoris   exhibit  enhanced   cold  tolerance
这个里面做过洋葱表皮亚细胞定位,看看对你有没有用
6楼2014-06-19 18:05:07
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