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shaquila金虫 (正式写手)
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[交流]
关于洋葱表皮亚细胞定位的问题～～已有7人参与
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构建好了GFP fusion载体，本来是要用基因枪的，后面发现做不了 问问能不能用农杆菌介导的方法做，我自己试试一下，方法如下，但是貌似没有侵染进去，请问需要怎么改进？ 2.8盘1洋葱表皮预培养 用镊子撕取洋葱里表皮 1cm2小块放在MS培养基上，28℃预培养5h。 2.83)侵染液制备 将菌液加入含抗生素的LB培养基，培养过夜，5000离心5分钟，收集菌体，LB重悬浮，分光光度计测定菌液浓度，其浓度调至OD＝1左右。 2.83)浸染 将上述菌液倒入到预培养培养基中，泡 30min，期间摇动数次。倒去菌液，将洋葱表皮置于灭菌滤纸上吸干表面菌液。 接入共培养培养基（MS培养基加AS），28℃暗培养2天观察。 |
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2楼2011-06-13 23:01:04