应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于western blot的一两个实验疑问。
21/1返回列表
查看: 1262  |  回复: 6
查看全部回帖@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 关于western blot的一两个实验疑问。

1.我的二抗是驴抗羊，洗二抗1小时后发现背景还是很深，这时我能把膜再拿回来，重新多洗1小时，再加ecl曝光显色吗？
2.第二个问题是：二抗本来是室温下侧摆摇床孵育2h的，可是别人占用着，这时我放到4度的冰箱的摇床上孵育，得孵育多久？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2011-06-11 11:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jsk10

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-06-14 18:25:10
a83875785(金币+1): 2011-06-14 21:34:14
1、多洗是没用的，抗体已牢牢吸附在膜上了，解决办法是转膜后进行封闭时，封封闭液浓度稍微加大，或延长封闭时间，使封闭更完全；降低二抗浓度或二抗孵育时间。
2、二抗孵育即使在室温下也不需要太长时间的，我们做的话室温或37度30min即可，最多1h，要是4度的话可适当延长时间，2h也是足够可以了。
   以上为本人实验室条件下的情况及参数，希望有帮助。
赞一下(1人) 回复此楼
互相帮助！
6楼2011-06-14 18:09:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 a83875785 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭