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临风7071

木虫 (正式写手)

[求助] pcr末端加A

各位，我用高保真的酶pcr，产物无A，先要加A，请问，我纯化后的pcr产物，加taq+dATP+Buffer，那么我需要加MgCl2吗？
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1楼 2011-06-06 20:48:09
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临风7071

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hxinzheng at 2011-06-06 21:08:47:
看用什么taq酶，看taq酶buffer中有没有加过Mgcl2，我们一般用rtaq，有时也用Extaq，buffer中都有Mgcl2

我买的takara的rtaq，buffer中不带Mgcl2，所以我应该加Mgcl2是吧？
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6楼2011-06-07 19:05:32
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hxinzheng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-06-06 21:27:29
临风7071(金币+1): 2011-06-07 19:05:48
看用什么taq酶，看taq酶buffer中有没有加过Mgcl2，我们一般用rtaq，有时也用Extaq，buffer中都有Mgcl2
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-06-06 21:08:47
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

临风7071(金币+1): 2011-06-07 19:05:52
taq酶买来的时候不是都带了buffer了吗？就用人家带的就好了。 跟做PCR几乎一样，就是反应是只一步而已。反应时间尽量长点（比如1h），保证反应完全。
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摒气动方息，宁神心自明。
3楼2011-06-07 08:10:10
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amilie030312

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

临风7071(金币+1): 2011-06-07 19:05:57
有的Taq给到的是Mg单独一管不在Buffer里的，所以要看买到是啥Taq酶了。
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4楼2011-06-07 12:22:15
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