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木虫 (正式写手)

[交流] 蛋白电泳问题已有2人参与

各位同仁：
最近在做原核表达，蛋白大小为80kDa,准备用浓度为10%的分离胶，想问一下SDS——PAGE电泳时电流和电压的选择？谢谢！

1楼 2011-06-05 12:24:57

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木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+2): 谢谢参与，欢迎常来生物综合版 2011-06-07 19:07:52

引用回帖:

Originally posted by backsunboy at 2011-06-05 12:24:57:
各位同仁：
最近在做原核表达，蛋白大小为80kDa,准备用浓度为10%的分离胶，想问一下SDS——PAGE电泳时电流和电压的选择？谢谢！

我们实验室分子量也子啊80KDa左右， 12%分离胶，电压60--120 你可以试试

3楼2011-06-05 20:48:21

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铜虫 (小有名气)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

因为你的分子量较大，建议你用8%的胶，这样可以把下面的条带都跑出去，让上面的条带间距变宽，这样就算杂蛋白比较多，也很容易的辨认出表达的结果。
至于电压，跑浓缩胶的时候用70v，跑分离胶的时候用110v。

2楼2011-06-05 18:05:25

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