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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 含40g/l 葡萄糖的培养基灭菌后用DNS法测还原糖应为多少？请指教！
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zjf780526

铜虫 (小有名气)

[求助] 含40g/l 葡萄糖的培养基灭菌后用DNS法测还原糖应为多少？请指教！

培养基成分为:42gL-谷氨酸钠，KH2PO4，MgSO4,KCl,FeSO4,CuSO4,MnSO4!用作发酵培养基培养枯草杆菌，定时取样DNS法测定还原糖含量，发酵0h时测得的还原糖含量为12g/l左右！可许多参考文献都是42g/l.
请问是我操作有误吗？葡萄糖需要单独添加吗？请指教！

[ Last edited by lovibond on 2011-6-29 at 08:36 ]
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1楼 2011-06-02 15:55:15
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wujia115

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
小损样儿(金币+1): 感谢专家顾问的应助，要记得常来帮助那些迷惑的虫友噢。 2011-06-02 17:21:21
如果含有葡萄糖的培养基用高压水蒸汽灭菌，会发生反应而有所损失，测定值应该小于添加的葡萄糖量才对。
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2楼2011-06-02 16:13:03
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zjf780526

铜虫 (小有名气)
但是所有参考文献都和初始时数据相同呀！是他们错了吗？
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3楼2011-06-02 21:23:48
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fajiaoTT

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果想确定是否在灭菌过程中损失葡萄糖，可以不配成培养基，直接准确称量葡萄糖，灭菌后测定，注意葡萄糖的量应稀释到标准曲线的中间部位，偏高或偏低都会造成结果不准确。祝你好运
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不能吃苦，为何做人！
4楼2011-07-04 20:23:24
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juno_j

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
hsd3521: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励 交流 2012-06-25 19:12:52
培养液中有高浓度铵离子或者铵根存在的时候，会与葡萄糖发生反应。浓度回大幅度降低。你的谷氨酸钠是含有氨基的。
最近实验要测发酵液中的碳、氮利用率也因为这个很困扰。只要处在一个环境里加热就会发生反应。初始值的话还可以用分开灭菌来解决，但是培养后就很难搞。
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5楼2012-06-25 16:06:54
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juno_j

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2416986楼: Originally posted by juno_j at 2012-06-25 16:06:54
培养液中有高浓度铵离子或者铵根存在的时候，会与葡萄糖发生反应。浓度回大幅度降低。你的谷氨酸钠是含有氨基的。
最近实验要测发酵液中的碳、氮利用率也因为这个很困扰。只要处在一个环境里加热就会发生反应。初始 ...

不知道你解决这个问题了没有，因为实验条件限制，不能用HPLC法测定，所以最近在考虑碘量法，你呢？
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6楼2012-07-18 16:03:34
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