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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 用真菌CTAB方法提细菌DNA可否？
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p120933799

金虫 (小有名气)

[求助] 用真菌CTAB方法提细菌DNA可否？

本人不小心将细菌当成了真菌，摇菌后晾干，加液氮研磨，之后按提真菌方法提了该菌DNA，最后还对提取的dna跑了个胶，最后显示是一条带，紧接着用真菌的ITS1和4跑PCR，结果咋跑都没出结果，都是白板，之后询问老师，老师说从菌落观察，该菌种为细菌，之后我就用PH和PA细菌通用引物跑PCR，跑胶检测PCR结果，结果发现有四五条带，在1500左右的有两条亮带，前面还有两三条不怎么亮的带……请问为啥啊？？！！
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1楼 2011-06-01 21:59:13
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springTT

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by springTT at 2011-06-03 11:36:49:
可能是非特异性条带吧

简单一点，重提一次DNA 好了。可能与提的DNA质量有关吧
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5楼2011-06-03 17:47:05
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松虱

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

p120933799(金币+1): 那为啥出现四五条带？ 2011-06-03 10:47:46
p120933799(金币+2): 2011-06-03 20:38:28
提取的话其实是没有多大问题的 细菌一般是用SDS来破壁  只要你用液氮研磨了 一般就可以了
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2楼2011-06-02 20:01:34
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malstose

金虫 (正式写手)
可以的，我们同学就是这样的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2011-06-03 09:43:37
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springTT

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

p120933799(金币+1): 讲不通啊，既然是细菌通用引物PA和PH，咋会出现那么多条带呢 2011-06-03 17:01:12
可能是非特异性条带吧
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4楼2011-06-03 11:36:49
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