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caisanrenju

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


树树8013(金币+1, 食品EPI+1): 板块欢迎你常来讨论交流。 2011-06-01 22:55:23
张华www(金币+5): 很有帮助,可惜我金币少,要不一定多给,十分感谢啊 2011-06-02 08:28:02
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 09:46:45
我做的时候,EB染色5min,脱色15min,配EB染液和洗脱液最好用你的电泳缓冲液。按照你的染色脱色条件,如果我没猜错的话,背景应该很亮吧?染30min我觉得没必要,时间太久了。脱洗一次就够,多放点液体,可以保证你的胶完整。

有关你条带集中在中间,个人觉得有几个可能的原因:
1。PCR偏好严重,条带相似度较高,导致集中在一个区域
2。40%-55%的变性范围不合适,可尝试下再缩小变性的范围,比如45-55
3。灌胶失误,胶的变性梯度不均匀

最后,我觉得LZ应该了解,如果一个条带在DGGE胶中变性了,你再电泳,这个条带也是几乎不动的。这涉及到DGGE分离的原理,所以你后来帖子中的尝试是没有意义的。
9楼2011-06-01 20:30:19
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