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张华www

铁虫 (初入文坛)

[求助] DGGE,跑出好的图的师兄师姐传授下经验啊

本人用DGGE分析食品在贮藏过程中菌相变化,跑了两个多月了,一张好的图都没有,实在不知怎么办啊,pcR产物经凝胶电泳检测结果很好。DGGE有些图细小的条带跑不出来,有些图有雪花,有些条带弯曲,可每次操作都挺规范的啊,请高手指点啊!

[ Last edited by 张华www on 2011-5-31 at 10:49 ]
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张华www

铁虫 (初入文坛)


junwen6516(金币+1): 鼓励交流 2011-06-01 23:41:19
这是相对比较好的图了,可是中间的条带一大团的,不好看啊,后来再继续跑,前面那些小的条带都出不来
电泳条件是:8%聚丙烯酰胺凝胶,尿素浓度梯度是40%-55%,200V预电泳10min,85V电泳16h,电泳结束后EB染色15min,再用二级水漂洗三次,在用凝胶成像仪拍照
请大家看看到底哪里出了问题?
对了,每次制胶时,取出梳子的时候,点样孔处玻璃上总会粘点胶,又清除不了,点样总成一片,这有关系吗?
7楼2011-06-01 17:30:24
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查看全部 16 个回答

jayzhao520

木虫 (正式写手)

楼主注意自身安全啊
国合通用(青岛)测试评价有限公司,国家新材料测试评价平台-青岛实验室。
2楼2011-05-31 14:32:32
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小小甜児

金虫 (正式写手)

★ ★
树树8013(金币+2): 也快一年的虫友了,怎么不常来自己的食品板块发帖回帖呢。板块欢迎你的到来。 2011-05-31 17:24:22
我跟楼主的课题有点点类似,我是看产品整个生产过程中可能引入的致病菌。用T-RFLP技术,PCR产物经凝胶电泳检测结果是好的,等到我酶切后就什么都没了,整个实验就这样没了,师姐说可能温度太搞,DNA讲解了~
在这个幽静的夜晚里,我给自己打了几个电话,打给过去的我,同她聊聊往事,打给未来的我,与她谈谈心事,打给现在的我,问问她最近过的如何~
3楼2011-05-31 17:08:22
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张华www

铁虫 (初入文坛)

是啊,做过DGGE的虫友给点建议啊
4楼2011-05-31 17:49:39
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