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张华www

铁虫 (初入文坛)

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[求助] DGGE,跑出好的图的师兄师姐传授下经验啊

本人用DGGE分析食品在贮藏过程中菌相变化，跑了两个多月了，一张好的图都没有，实在不知怎么办啊，pcR产物经凝胶电泳检测结果很好。DGGE有些图细小的条带跑不出来，有些图有雪花，有些条带弯曲，可每次操作都挺规范的啊，请高手指点啊！

[ Last edited by 张华www on 2011-5-31 at 10:49 ]

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1楼 2011-05-31 10:48:15

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张华www

铁虫 (初入文坛)

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junwen6516(金币+1): 鼓励交流 2011-06-01 23:41:19

这是相对比较好的图了，可是中间的条带一大团的，不好看啊，后来再继续跑，前面那些小的条带都出不来
电泳条件是：8%聚丙烯酰胺凝胶，尿素浓度梯度是40%-55%，200V预电泳10min,85V电泳16h,电泳结束后EB染色15min，再用二级水漂洗三次，在用凝胶成像仪拍照
请大家看看到底哪里出了问题？
对了，每次制胶时，取出梳子的时候，点样孔处玻璃上总会粘点胶，又清除不了，点样总成一片，这有关系吗？