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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 淀粉酶的吸光度
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swqowen

金虫 (职业作家)

勋章归天

[求助] 淀粉酶的吸光度

按照国标法做测试淀粉酶的活性，可是每次到最后的反应液加入稀释成的碘液和盐酸失活时里立马颜色变成黑紫色，吸光度根本没发测试！开始以为是酶的浓度太高（稀释100倍（后来稀释10000倍还是那样，谁做过这方面的，请教一下，是不是淀粉过期了（可溶性淀粉都是先配先做的）还是其他什么问题？
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1楼 2011-05-30 13:25:31
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米曲霉淀粉酶

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
552155楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-31 18:44:53
我也怀疑测酶活力的时候有些偏差，所以才提了那些问题。

碘法我是自己优化过的，很精确，都可以用来测定内切酶的最适作用温度了，梯度为5度的。

学长你好： 最近我在做真菌产α-淀粉酶的实验，对碘法做酶活一直有些疑问，看过一些文献，发现不是很详细，也查过α-淀粉酶制剂的酶活测定国标，就跟楼主的差不多，可我用淀粉做碳源，发酵液里有淀粉，不太适合，跪求学长的碘法优化方案啊
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35楼2012-10-18 09:28:00
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jianghongyu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
swqowen(金币+2): 2011-05-30 16:33:37
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-05-31 21:46:53
你可以采用DNS（3、5二硝基水杨酸）法测定酶活
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2楼2011-05-30 15:34:15
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从现在做起

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

swqowen(金币+3): 我在重新配置 2011-05-30 16:33:40
是不是酶的问题，那样似乎淀粉根本没有被水解
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3楼2011-05-30 15:39:30
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ppsu303

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

找不到问题，就都重新配吧
一样一样的来，实验无捷径，耗得起时间和精力吧
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你懂的~~
4楼2011-05-30 16:10:34
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