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zct2008

至尊木虫 (著名写手)

应助: 8 (幼儿园)
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专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 求助：基因组文库构建时一般用什么Marker？

本人正在构建一个细菌基因组文库，按照《分子克隆实验指南》，提取全基因组以后用Sau3AI进行部分酶切，然后电泳分离30-45kb大小的片段。想请教一下大家：电泳分离30-45kb大小的片段时一般用什么Marker？一般常用的Marker没有这么大的，不知道大家都是用什么作为分子量标准的？请做过基因组文库构建的朋友帮忙，非常感谢！

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天行健，君子以自强不息；地势坤，君子以厚德载物。

1楼 2011-05-30 09:27:26

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他她0328

银虫 (小有名气)

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专业: 病原细菌与放线菌生物学

引用回帖:

Originally posted by srlee at 2011-07-08 10:46:14:
λHindIII 最大条带确实是23Kb，如果是低电压过夜电泳（脉冲场电泳就另说了）的话，建文库要割胶回收的30-40K条带也就在23kb上面一点点，如果建文库时找不到40kb左右的marker完全可以用它指示一下，等你做的多 ...

我要跑的就是脉冲场电泳。。。那还能不能用λHindIII ？分离大片段DNA是不是一定要用脉冲场电泳？