应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液pcr检测不对
51/1返回列表
查看: 2093  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

qyqy512

铜虫 (初入文坛)

[求助] 菌液pcr检测不对

最近做连接，菌液pcr检测条带不对，目的条带是2000左右，菌液pcr出来是1000，做了两次连接，都是这样的结果。求助高手啊
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-28 15:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qyqy512

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-05-28 15:37:34:
1：载体和基因酶切是否完全呢？可以上图看看
2：连接体系如何？时间呢？
3：感受态细胞的活性呢？
4：也不定用菌液做，可以用划到板子上的菌裂解后当模板的；
5：上图，我来看看。如果没有连接上，应该不会有 ...

感受态应该没问题，做别的基因都好，直接连TA克隆过夜，没有酶切。
赞一下 回复此楼
3楼2011-05-28 15:55:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

1949stone(EPI+1): 鼓励 2011-05-28 19:30:15
1：载体和基因酶切是否完全呢？可以上图看看
2：连接体系如何？时间呢？
3：感受态细胞的活性呢？
4：也不定用菌液做，可以用划到板子上的菌裂解后当模板的；
5：上图，我来看看。如果没有连接上，应该不会有条带的，为什么还会P出来一条1000bp的条带呢？难道是非特异性的？
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-05-28 15:37:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 连续鼓励 2011-05-28 19:30:26
引用回帖:
Originally posted by qyqy512 at 2011-05-28 15:55:10:
感受态应该没问题，做别的基因都好，直接连TA克隆过夜，没有酶切。



TA克隆可以不用酶切吗？
还有你的电泳图给标注一下撒。。。
我给你的回复，你排除一下可能的情况。。。
一般就是那几个问题的。
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-05-28 16:12:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qyqy512

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-05-28 16:12:17:
TA克隆可以不用酶切吗？
还有你的电泳图给标注一下撒。。。
我给你的回复，你排除一下可能的情况。。。
一般就是那几个问题的。

那几个方法我之前也有想到，也一一排除过了，只有那个划板的方法我之前都没做过，电泳图上面的是目的片段cDNA PCR，下面的是菌液pcr。我质粒提出来酶切是糊的，没有目的条带。
赞一下 回复此楼
5楼2011-05-28 16:26:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭