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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酵母质粒转化及提取验证问题求助
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jane晨宝儿

铜虫 (初入文坛)
对啊，做个PCR测一下，快速还简单，测序要等很长时间啊，多麻烦~~
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11楼2012-12-09 23:00:48
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Trista`

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
337140楼: Originally posted by baby1_9253344 at 2011-05-26 15:17:31
最近需将穿梭质粒转入啤酒酵母W303内，用化学法（醋酸锂）转化，URA选择性平板培养数日后终于出现阳性菌落。为了鉴定阳性转化子是否转入质粒，我挑了阳性菌落，用酵母质粒抽提试剂盒提取了质粒，用这个质粒转入DH5a ...

楼主，我想请教下 你的酵母化转的体系  我最近在做 可是转化效率很低啊。。。。急啊  老师又在催 。。。大神救救我啊
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结交优秀的人
12楼2013-03-27 10:16:02
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liuan6126

铁杆木虫 (正式写手)
我做酵母，酵母的质粒量太少，提出来的量太少，再转化大肠杆菌，成功率极低，建议用楼上所说酵母菌落PCR，做好阴阳对照。其实，用缺陷性培养基筛选出来的，都差不多，当然，你得涂布阴性对照平板验证。
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13楼2013-10-28 22:35:31
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