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liujie2008金虫 (小有名气)
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[求助]
Western blot中出现的问题-求高手指点
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| 我做Western blot，考染的结果很好，转膜的时候用的是180mA，转了1.5h，10%脱脂奶粉TTBS封闭4h，一抗1:1500 4°过夜，TTBS洗三遍，每次5Min，二抗1:800，室温2h，TTBS洗三遍，每次5Min，TBS洗一遍5min，然后加的显色剂，怎么膜上没有条带呢？做了两次了，第一次的时候什么都没有，膜背景很干净，第二次背景很脏，明显的没有封闭好的样子，但是方法都是一样的，怎么这样呢？一点带都没有，我用的是PVDF膜，求高手指点 |
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 蛋白质生物学实验经验 |
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4楼2011-05-30 15:53:38
烂铁
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 967.4
- 散金: 304
- 帖子: 271
- 在线: 78.6小时
- 虫号: 886926
- 注册: 2009-10-28
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
2楼2011-05-29 16:12:39
3楼2011-05-30 00:46:25
5楼2011-05-30 18:09:41