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天使托

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T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-24 21:09:29
jayxj(金币+5): 非常感谢 2011-05-25 16:16:54
其实个人觉得楼主说的:以上条件、试剂连接大肠杆菌载体(pcDNA3、pMD18-T、pTA2和pGEX4T-1)都未出现问题;给这些载体克隆基因没有问题并不见得给你的那个载体克隆也没有问题嘛,这不问题出现了吗?

克隆一个基因其实个人觉得关键在于连接和感受态细胞。。。按照你上面所述,连接体系应该也不会出现什么问题,连接时间可以稍微短一些,7小时---10小时试试。。。

另外抗生素有没有问题呢?浓度会不会太大了?

你的载体和基因酶切是否完全?如果酶切不完全,也会影响你后期的连接的。。。

可以变换体系再试试。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-05-24 19:54:46
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