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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


[交流] 不同板的细胞密度转换问题,药物浓度问题

我实验用到6孔板96板和24孔板,之前考虑的是板的生长面积,所以都是按面积比来转换细胞密度。
但今晚突然想到一个问题,那我的药不也应该相应的变?而不是固定终浓度??
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Chlo_Q(金币+1): 不太理解,我做96孔板是100微细胞悬液,加1微药物溶液(×100)。改24孔板,我可以是低密度加1毫升,或者高密度加0.5毫升,细胞数是一样的,但体积不同,保持药物浓度不变的话,同样是那么多细胞,所受的药量就不算设计的那样啦 2011-05-26 02:54:31
Chlo_Q(金币+3): 底面积和体积……其实,好像96孔板面积是0.32平方厘米,工作体积是100-200微升,6孔板面积是9.5平方厘米,但工作体积是1-3毫升,不成比例的 2011-05-26 11:05:37
因为你的药的体积也在变,底面积(细胞密度)对应的是你的溶液体积,你的6孔板加2ml,24孔板对应的也就是0.5ml
2楼2011-05-25 08:13:45
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maoyz0127

金虫 (正式写手)



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Chlo_Q(金币+1): 细胞对药物有没有代谢作用呢? 2011-05-26 10:57:52
Chlo_Q(金币+1): 2011-06-10 19:46:47
药物浓度可以固定,不同板每孔加样体积不一样啊
3楼2011-05-25 08:21:35
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mafang68

金虫 (著名写手)



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Chlo_Q(金币+4): 谢谢,好像不管细胞数有多少,细胞所处的外环境都是同样的药物浓度,是这意思吧?我一直在想细胞会不会代谢消耗药物呢…… 2011-05-26 10:54:54
药物浓度当然要固定啦,加样体积不同,你的药物量也是不同的
4楼2011-05-25 09:00:13
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mafang68

金虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
Chlo_Q(金币+5): 谢谢,基本明白了。细胞数根本生长面积定,确保其活性;加药量根据体积,确保其终浓度固定,对吧? 2011-05-26 16:51:46
不同板因为孔体积不同,加的培养基体积不同,这就需要调整药物量,保持终浓度相同。同时你的细胞量也需要相应增加。至于你的细胞对药物有没有代谢就不好说啦,毕竟药物代谢需要的微环境很重要,不是单个细胞环境就可以的。
5楼2011-05-26 11:16:34
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Chlo_Q(金币+3): 2011-05-26 17:20:12
0.32对100
9.5对3ml
有问题吗
6楼2011-05-26 11:21:47
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-05-26 11:21:47:
0.32对100
9.5对3ml
有问题吗

(°ο°)成比例了哦
一定得这样吗?我看着有些文献很奇怪,对不上比例的
如果是这样子,那24孔呢?
7楼2011-05-26 16:44:16
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mafang68

金虫 (著名写手)


Chlo_Q(金币+1): 2011-06-03 09:18:23
恩,对,呵呵
8楼2011-05-26 16:59:33
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Chlo_Q(金币+1): 血清对OD值的影响是很大,甚至药物对OD值都有影响。但,你加DMSO前,难道都没有离心吸上清吗?呵呵 2011-05-26 17:24:16
OD值与培养液厚度关系是很大的
9楼2011-05-26 17:08:24
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by mafang68 at 2011-05-26 16:59:33:
恩,对,呵呵

对不起,当前用户已经获得 9 个金币了,不能给同一个用户超过10个金币。原来给不了你金币了……
10楼2011-05-26 17:22:12
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maoyz0127

金虫 (正式写手)



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Chlo_Q(金币+2): agreed,跟我想的一样~ 2011-05-27 09:51:21
Chlo_Q(金币+1): 2011-06-10 19:45:24
Chlo_Q(金币+2): 2011-06-10 19:45:45
Chlo_Q(金币+2): 2011-06-10 19:47:36
引用回帖:
Originally posted by maoyz0127 at 2011-05-25 08:21:35:
药物浓度可以固定,不同板每孔加样体积不一样啊

正常药物的代谢是在肝脏,需要肝微粒体P450酶系,单个细胞对药物代谢作用应该不大
11楼2011-05-27 07:49:46
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-05-26 11:21:47:
0.32对100
9.5对3ml
有问题吗

有问题~
按这比例
96孔板是0.32对0.1
那24孔板难道是1.9对0.3125??
连工作体积都不到咧~
12楼2011-05-31 23:57:03
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Chlo_Q(金币+2): 版主~您的问题我说了,烦请进一步跟我讲一下24孔板的工作体积问题~ 2011-06-03 09:21:09
引用回帖:
Originally posted by Chlo_Q at 2011-05-31 23:57:03:
有问题~
按这比例
96孔板是0.32对0.1
那24孔板难道是1.9对0.3125??
连工作体积都不到咧~

一个 数学问题

你怎么得出的???
13楼2011-06-01 07:53:46
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-06-01 07:53:46:
一个 数学问题

你怎么得出的???

按您的比例啊
“0.32对100
9.5对3ml
有问题吗”
面积放大30倍,体积跟着成30倍……
14楼2011-06-01 23:50:27
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
Chlo_Q(金币+1): 我之前好像有点错误,按比例应该是0.6毫升而不是0.3毫升…… 2011-06-03 09:26:57
引用回帖:
Originally posted by Chlo_Q at 2011-06-01 23:50:27:
按您的比例啊
“0.32对100
9.5对3ml
有问题吗”
面积放大30倍,体积跟着成30倍……

那你的1.9对应的30倍是多少呢?
15楼2011-06-02 08:02:42
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-06-02 08:02:42:
那你的1.9对应的30倍是多少呢?

1.9相对于0.32,最多只能算放大了6倍吧……
16楼2011-06-02 08:54:52
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-06-01 07:53:46:
一个 数学问题

你怎么得出的???

版主~~
我可以跟我解释一下吗?真的不解中。因为我要测的是上清液中的细胞因子,用的方法又是生物活性检测法,体积一变,取的那20微升准备测定的上清液里的浓度就会不同……而且我还想设三个时间点每次取100微升多次测定,体积至少要有600微升以上吧~
17楼2011-06-03 09:16:06
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czcpudai

铜虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,我想问一下您做六孔板的实验时候,细胞开始的接种量是多少? 还有您给药的时候,是在接种后多长时间开始给药的??谢谢!
18楼2012-11-26 13:17:06
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czcpudai

铜虫 (正式写手)


还有一个问题,您用六孔板的时候一个孔里面要加多少毫升的培养液???
19楼2012-11-26 13:18:27
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