24小时热门版块排行榜    

查看: 3100  |  回复: 13
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

meizishu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meizishu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

8楼2011-05-23 20:22:23
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

yabxxh

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(EPI+1): 来也 2011-05-21 12:39:37
呵呵,这个问题我以前遇见过。
既然你的对照质粒能跑出来,那说明质粒没问题。
为什么单酶切和双酶切都没有了呢,我们通常叫切碎了,因为你说的很简单,并没有给出酶切体系中各个成分的数据,以及酶切时间,哪个公司的何种内切酶,笼统分析如下:
1.你用的酶有星号活性,而你采用的是10ul体系,枪头随便沾上一点内切酶就会过量,尤其你做双酶切的时候,酶过量的结果就是甘油的浓度过大,然后内切酶产生星号活性,切碎了你的质粒。
2.你的酶切时间过长,切碎这种情况通常发生在过夜酶切的时候,中间的原因我就不说了,如果只是鉴定的话,建议快速内切酶酶切30min,普通内切酶3h。
3.你用的是快速内切酶,酶切时间过长。切碎的情况常见于快速内切酶,普通的也有,但是我和不幸的没有遇到过。
4.你没有好好研究内切酶说明书,忽略了说明书上的注意事项。
5.最不可能的情况,你选错了温度。
以上,好运
2楼2011-05-21 09:28:09
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deblway

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
额。。。个人感觉楼主给的信息太少。。对照质粒的量(不是体积,大概多少ng)和酶切时用的都是多少。。。至于星活性会将质粒切的那么碎表示怀疑。。当然除非是时间超级长。。但我估计那么长时间酶活性也没了。。
海贼王!哥当定了。。。。
4楼2011-05-21 15:45:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meizishu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

6楼2011-05-22 09:24:21
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +3 zhaosm1982 2026-08-27 3/150 2026-08-27 10:48 by iwuli
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 面上合作单位盖章 +3 ssyjh 2026-08-27 3/150 2026-08-27 09:59 by 阿拉贡aragon
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 17/850 2026-08-27 08:20 by 大萍1987
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +7 晴天加油 2026-08-26 8/400 2026-08-27 07:53 by longfie172
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
信息提示
请填处理意见