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yzhlasiI

铁虫 (正式写手)

[求助] 液相 进混品梯度洗脱出现很多杂峰 这是怎么回事?

HPLC进标品梯度洗脱出现很多杂峰,且单标峰也不好

1.HPLC进混品梯度洗脱出现很多杂峰,空进甲醇亦出现这些杂峰,这是怎么回事?
2.标品出峰不好,像是分叉

注:我用的流动相是乙腈和水 (乙腈是迪马公司的,水是用超纯水机制备的,并用乙酸调pH2.8),1月份进样品时未出现这样的杂峰。

色谱条件:0-50min:95%-5%水

混标-4月份
经过跑单标,只有前26min的峰是目标峰,后面的峰都是杂峰



甲醇-4月份 (2)


阿魏酸-4月份 (1)



样品--1月份
此是1月份跑出的图,挺正常
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shaohuiwu007

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我是做蛋白质分离的,前段时间我遇到的问题是进空白就有很多杂峰,后来洗洗柱子就好了,我觉得是柱子上有难以洗脱下来的吸附物,建议采用梯度长时间洗柱子,实在不行,可以试试异丙醇(色谱级),低流速。
知识属于整个人类,大家一起分享,共同促进人类的发展。
4楼2011-05-16 14:45:01
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xkp123

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

检测波长多少?用异丙醇把系统清洗看看,不接检测器
2楼2011-05-13 20:38:35
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by xkp123 at 2011-05-13 20:38:35:
检测波长多少?用异丙醇把系统清洗看看,不接检测器

请看一下你所用的醋酸是不是换瓶了或者换厂家了,如果检测波长接近末端吸收的话,很可能会出现这种情况,请换一台液相、一根色谱柱,换一个瓶试剂,重新配制样品与对照品溶液试试,我想问题肯定能搞清楚。
gwmgyp
3楼2011-05-16 14:00:03
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hbwzh

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得是柱子上有难以洗脱下来的吸附物,你可以先用甲醇水冲洗,然后用纯甲醇,再用乙腈冲洗柱子。注意用低流速,预防冲洗出的吸附物量大,堵塞色谱柱。
虚心学习
5楼2011-05-16 17:02:30
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