24小时热门版块排行榜    

查看: 3879  |  回复: 9
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liuwei78

铜虫 (小有名气)

[求助] 质粒导入大肠杆菌

请问大家,较大的质粒导入到大肠杆菌感受态细胞里会不会使它的生长速率降低或是菌落形态变化?我最近将一个连接后六千多bp的质粒导入到大肠杆菌感受态细胞里,长出来的菌很小,而且挑单菌落要摇瓶18小时以上才有浑浊,请大家帮忙解释下。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwei78

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yuxia82012 at 2011-05-12 18:47:50:
你这个质粒做啥用的?表达蛋白的?如果是表达蛋白的有可能产生的蛋白对菌体本身有毒害作用导致菌体生长得不好

质粒是pMD19-T,上面连了几个片段,所以总共的长度有6kb多。
4楼2011-05-12 19:06:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 有点晕 2011-05-12 19:02:38
liuwei78(金币+2): 2011-05-13 08:39:36
才6KB那么小,我的科斯质粒60KB,导入之后一样长得很快,宿主是DH5a、BL21、JM109,我怀疑是培养温度不够37度导致长得慢,是不是放错放到28度去了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-05-12 18:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-12 19:03:05
liuwei78(金币+2): 2011-05-13 08:39:45
你这个质粒做啥用的?表达蛋白的?如果是表达蛋白的有可能产生的蛋白对菌体本身有毒害作用导致菌体生长得不好
在等待中涅槃重生
3楼2011-05-12 18:47:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lly198784

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-05-12 20:08:48
liuwei78(金币+2): 2011-05-13 08:39:55
我觉得你的片段不算长啊,你是用的什么转化法啊?一般CaCl2 法不会使菌体形态发生变化的,如果是电转法会发生微小的形态变化,是不是你表达的问题啊。还有你用的什么培养基啊?
5楼2011-05-12 20:05:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见