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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 毕赤酵母转化问题
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2585165

金虫 (正式写手)

[求助] 毕赤酵母转化问题

有大虾在做毕赤转化么？
    我最近转的都死掉了，确切的说是小菌长着长着就变色了，大概是死掉了，也都长不大，最大的菌落也就和大肠的差不多。
    望哪位大虾能指点下？谢谢。

    还有一个问题，MD板子忘加生物素会怎样呢？

    急呀，谢谢了。
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哎呀呀，别老说我丑，比起小时候，我这还真算是漂亮了！
1楼 2011-05-12 09:29:03
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

pidou213

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-12 20:06:44
1、我的教训表明：做实验之前，或者说 每一次实验都要仔细阅读操作手册，操作手册不允许的就不要做。
2、对于“MD板子忘加生物素会怎样呢？”我想说的是：同学你应该灵活点想事情，没有生物素必然比有生物素长的可能会差一点。手册已经很仔细的告诉你怎么做了 你就好好做就好了 具体不明白的可以咨询 但是像培养基组分忘记添加的话 那就只有重做，没有什么结果可以探讨的  并且这个系统就是为了你方便才作为商品销售的，你又何必自找烦恼，非要弄明白不加或者多加什么组分之类的问题呢 更何况也没有人会特意去做一下这个不加生物素的实验吧

祝你好运
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见得多爱的多
2楼2011-05-12 16:24:57
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pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 2585165 at 2011-05-17 18:57:43:
这个表达手册我认为做酵母的都有，还是谢谢你。我现在是在摸索建立高效转化系统，你所谓的表达手册确实是能做出结果，但是还达不到要求。用手册的方法有些耗时间，而且效率不怎么高。
我现在的系统一直很稳定 ...

那就恭喜你啦 现在酵母稳定表达真的很不容易
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见得多爱的多
8楼2011-05-18 11:44:38
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普通回帖

2585165

金虫 (正式写手)
帅哥，我是想问一下，在不加生物素的情况下，MD板子长出的菌株状态。
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哎呀呀，别老说我丑，比起小时候，我这还真算是漂亮了！
3楼2011-05-12 16:56:55
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2585165

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2011-05-12 16:24:57:
1、我的教训表明：做实验之前，或者说 每一次实验都要仔细阅读操作手册，操作手册不允许的就不要做。
2、对于“MD板子忘加生物素会怎样呢？”我想说的是：同学你应该灵活点想事情，没有生物素必然比有生物素长的 ...

没有想去知道什么成分什么作用什么的，只是想找到菌株死亡原因。
对于生物素没加也是猜测中的一个原因。
不过同学很大牛的说。
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哎呀呀，别老说我丑，比起小时候，我这还真算是漂亮了！
4楼2011-05-12 17:00:21
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pidou213

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

2585165(金币+15): 2011-05-17 18:57:58
引用回帖:
Originally posted by 2585165 at 2011-05-12 17:00:21:
没有想去知道什么成分什么作用什么的，只是想找到菌株死亡原因。
对于生物素没加也是猜测中的一个原因。
不过同学很大牛的说。

那我只能说 一个人死亡可以饿死，病死，甚至于累死。你说的酵母死亡的原因我只能说你绝对没有按照操作手册的来做，否则绝对不会导致酵母死亡。对于你现在的心情我很了解，但是我想说：童鞋，认真是做科研的最重要的，如果再有操作手册的情况下还出现问题我真的无话可说了。

附件是做毕赤酵母的中文翻译，希望对你有用。请仔细！！！！！！！！阅读

回答完毕，给币币吧
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见得多爱的多
5楼2011-05-13 17:19:08
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jlc0225

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

2585165(金币+5): 2011-05-17 18:58:02
酵母会长得很慢，然后饿死。

PS：楼上是大好人！感谢分享！
祝楼主好运！
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开始新的学习！
6楼2011-05-15 22:57:08
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2585165

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2011-05-13 17:19:08:
那我只能说 一个人死亡可以饿死，病死，甚至于累死。你说的酵母死亡的原因我只能说你绝对没有按照操作手册的来做，否则绝对不会导致酵母死亡。对于你现在的心情我很了解，但是我想说：童鞋，认真是做科研的最重 ...

这个表达手册我认为做酵母的都有，还是谢谢你。我现在是在摸索建立高效转化系统，你所谓的表达手册确实是能做出结果，但是还达不到要求。用手册的方法有些耗时间，而且效率不怎么高。
我现在的系统一直很稳定，只是上周的那批出现了问题，而且原因已经找到了，不过还是很感谢。
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hxswdl
哎呀呀，别老说我丑，比起小时候，我这还真算是漂亮了！
7楼2011-05-17 18:57:43
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zmc6363

新虫 (初入文坛)
忘记加生物素的话，酵母会长的很慢，不知道你的筛选板上还加抗生素作为筛选标记了没，若是加了，可能是因为抗生素的筛选压力加上biotin的缺失，导致即便有零星的几个阳性转化子，可能也很难长起来。
建议实验前还是仔细排查下，把能控制的不确定性因素降到最低，然后再好好实验吧，祝实验顺利！
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9楼2013-01-30 16:57:08
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)

Tortoise

文献杰出贡献
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 2585165 at 2011-05-17 18:57:43
这个表达手册我认为做酵母的都有，还是谢谢你。我现在是在摸索建立高效转化系统，你所谓的表达手册确实是能做出结果，但是还达不到要求。用手册的方法有些耗时间，而且效率不怎么高。
我现在的系统一直很稳定，只 ...

我也在毕赤酵母的转化，但是不单效率低，而且长出的菌落形态也变了，请问你用的什么表达体系，可否分享一下，先谢谢了
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Dripping Concentrated!!energetic and active！
10楼2013-12-24 12:04:14
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