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syn1985

木虫 (正式写手)

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[求助] PCR产物与T载体连不上求助

PCR产物与PMD-19 T载体连接 16度过夜
然后转化感受态细胞后挑单克隆菌液PCR检测的结果全为假阳性我的片段大小差不多200bp左右这个实验重复了3次了还是不行我连接的体系为载体1ul DNA 4ul soultion I 5ul 用的是宝生物的连接试剂盒感受态细胞换过一次都是从公司买的后来看网上说天根的感受态好不错我就试了一下发现还是假阳性愁死了

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1楼 2011-05-11 17:06:26

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syn1985

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引用回帖:

27楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-05-20 08:59:23
T载体真的会自连么..到哪加两个A呀......

对照很好做啊..你每次换一个东西..阳性对照,阴性对照都要做好...这是基本习惯啊..不然出问题哭都不知道..也浪费时间..

新手吧 T载体自连的现象不要太普遍还有一般做T载体连接不需要做对照浪费试剂和精力写文章也用不上