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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 感受态细胞的浓度多大合适
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司英

新虫 (初入文坛)

[求助] 感受态细胞的浓度多大合适

请教大家一个问题，做感受态细胞时，最后溶的细胞浓度多大最合适，我看有的溶后比较稀些，我做的比较浓，颜色发白，浓度大小对电转化影响大不大？
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1楼 2011-05-11 14:43:06
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jlc0225

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-05-12 00:52:46
司英(金币+1): 2011-05-12 11:44:27
引用回帖:
Originally posted by 司英 at 2011-05-11 14:43:06:
请教大家一个问题，做感受态细胞时，最后溶的细胞浓度多大最合适，我看有的溶后比较稀些，我做的比较浓，颜色发白，浓度大小对电转化影响大不大？

我们实验室是DH5a、BLP、BL21的大肠杆菌，一般用OD600测0.6时可以做感受态。有的实验室有超级感受态制备方法，那个转化效率高些。制备方法很不一样。
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开始新的学习！
3楼2011-05-11 20:33:15
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akina414

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-11 19:53:48
①　细胞生长状态和密度：最从-70℃或-20℃甘油保存的菌种直接转接用于制备感受态细胞的菌液。细胞生长密度以刚进入对数生长期时为好，可通过监测培养液的OD550来控制。TG1菌株的OD550为0.5时，细胞密度在5×107个/ml左右（注意：不同的菌株情况有所不同），这时比较合适，密度过高或不足均会影响转化效率。
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2楼2011-05-11 15:56:43
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小皮球邓

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-05-12 12:01:38
引用回帖:
Originally posted by jlc0225 at 2011-05-11 20:33:15:
我们实验室是DH5a、BLP、BL21的大肠杆菌，一般用OD600测0.6时可以做感受态。有的实验室有超级感受态制备方法，那个转化效率高些。制备方法很不一样。

我们实验室都是制备超级感受态，一般用OD600测0.35左右时就可以做，转化效率都很高。
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坚持就是胜利！
4楼2011-05-12 11:54:30
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tztboy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
997357楼: Originally posted by 小皮球邓 at 2011-05-12 11:54:30
我们实验室都是制备超级感受态，一般用OD600测0.35左右时就可以做，转化效率都很高。...

我想做个超级感受态细胞，能否提供一些步骤或者资源啊，谢谢
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5楼2012-05-31 11:01:18
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