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sunnyautumn

木虫 (小有名气)

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[交流] 求助HPLC缓冲盐浓度对紫外检测影响的问题

在液相方法摸索的过程中发现，流动相中缓冲盐浓度增加时，紫外的检测信号变弱，峰的锯齿现象很明显。这是怎么回事？希望有比较权威的解释！
PS：我用的缓冲盐是甲酸铵，使用的时候pH值在5.5左右。

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1楼 2011-05-07 12:09:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

leecius

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
sunnyautumn(金币+1):谢谢参与
sunnyautumn(金币+2): 2011-05-07 15:44:54
novus(金币+1): 说的不错！ 2011-05-07 21:00:12

楼主选择的检测波长是210nm，我分析了下，很有可能是你的甲酸铵的截止波长的缘故。根据朗伯比尔定律，光的吸收与溶液的浓度有关系的，当你增加了MP中甲酸铵的浓度后，基质的背景吸收就会相应的增强，这样扣除的多了，相当于把你目标检查物质的吸收一并扣掉了你增加浓度的那部分在210nm波长处的吸收，当你目标检查物的浓度没有变化时，增加MP中甲酸铵的浓度等于变相减少了你的目标检查物的浓度，所以就会发生紫外吸收变小的情况。