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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于蛋白纯化的问题
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

[求助] 关于蛋白纯化的问题

最近开始做蛋白，中量已经验证可溶。
破菌离心后镍柱吸附，用咪唑洗脱后脱盐，我们实验室用的是脱盐柱，洗脱的溶液是不是用文献上相关的透析液？
文献上这个蛋白是从动物组织中通过硫酸铵分级沉淀提取的，最后的透析液为3M的硫酸铵溶液，我在想用这个溶液洗脱下来会不会有影响？
还有脱盐柱到底什么原理啊？谢谢
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在等待中涅槃重生
1楼 2011-05-06 23:51:35
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
此为预备贴
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-05-07 01:18:39
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
rainwander(EPI+1): 2011-05-07 08:53:40
rainwander(金币+5): 和热心的虫友，鼓励 2011-05-07 08:54:30
scelab(金币+2): lz要求 2011-05-07 15:20:14
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-07 01:18:39:
此为预备贴

此为正式帖，因为直接回复时不能添加附件。
1、用脱盐柱来脱盐是最好的选择，比透析耗时短，比小脱盐柱脱盐完全。
2、洗脱的溶液不一定用文献上的，具体要看自己下一步要做什么实验，用什么溶液才不会影响那些实验。
3、文献上说的透析液不可能是3M硫酸铵，这样起不到脱盐的作用。
4、脱盐柱的原理为凝胶过滤。说明书见附件。
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3楼2011-05-07 01:26:12
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
把文献放上来吧
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2011-05-07 23:10:31
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