24小时热门版块排行榜    

查看: 3848  |  回复: 11
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

[求助] 我的放线菌细胞壁很难破,求助各位大虾

我想构建基因组文库,可是前面DNA提取就很头疼,按照操作手册上写的加入2mg/ml的溶菌酶破壁,但是水浴2h都不行,后来我把溶菌酶的浓度提高到10mg/ml还是不行,有没有谁有好的破壁方法啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
syn1985(金币+3): 太谢谢了 我试试 2011-05-05 09:26:01
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-05-05 17:29:20
不会的,放线菌属于阳性菌,很难破壁,我以前是做红球菌的属于放线菌科,加大溶菌酶的用量,就直接加买回来的溶菌酶粉末的,破壁效果很好,DNA的长度与你提取操作轻柔有关,至于研磨的方法我也用过,提出的总DNA,效率很高,但容易成粉末絮状,做DNA杂交没有问题,建库不行
帮助虫友,提升自己
9楼2011-05-04 16:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖


rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-05-05 17:27:42
可以试试经典的CTAB法
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-05-04 00:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

narcissusS

金虫 (小有名气)

一叶秋鸿

最近也是在头疼于厚壁菌的破壁,占座听课
想的复杂活得简单
3楼2011-05-04 08:53:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

syn1985(金币+5): 谢谢 不过不知道这样会不会对提取出来的DNA长度有影响呢 2011-05-04 15:34:20
rainwander: 一接种环的量是多少? 2011-05-05 17:28:40
本人的经验,加粉末溶菌酶一接种环的量,然后过夜
帮助虫友,提升自己
4楼2011-05-04 09:10:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我面上完蛋了 +10 且听虎啸 2026-08-20 11/550 2026-08-25 07:12 by echo8914667
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 8/400 2026-08-25 05:12 by BZKMTicpDhFj
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见